Einführung
Transformation ist der Prozess der Einführung von Fremd-DNA (z. B. Plasmiden, BAC) in ein Bakterium. Bakterienzellen, in die fremde DNA transformiert werden kann, werden als kompetent bezeichnet. Einige Bakterien sind von Natur aus kompetent (z. B. B. subtilis), während andere wie E. coli von Natur aus nicht kompetent sind. Nicht kompetente Zellen können kompetent gemacht und dann über einen von zwei Hauptansätzen transformiert werden. chemische Umwandlung und Elektroporation.
Beide Transformationsmethoden haben Vor- und Nachteile. Im Allgemeinen ist die chemische Transformation weniger fehleranfällig und schneller, jedoch führt die Elektroporation zu einer höheren Transformationseffizienz (Anteil der transformierten Zellen, die die fremde DNA tatsächlich aufnehmen). Weitere Informationen zu beiden Ansätzen finden Sie unter Klonen.
Protokolle
OpenWetWare verfügt bereits über eine Reihe von Protokollen zur bakteriellen Transformation, weitere sind jedoch immer willkommen.
If Wenn Sie eine Variante für eines dieser Protokolle verwenden, können Sie auf einer dieser Seiten einen Link zu Ihrem Protokoll hinzufügen, damit andere Benutzer ein für sie geeignetes Protokoll finden können. Wenn jemand die hocheffizienten Protokolle von Innoe oder Hanahan verwendet, fügen Sie hier bitte Protokolle hinzu.
Chemische Transformation
Wenn Sie eine chemische Transformation planen, sollten Sie diese sehen Seiten –
- Chemisch kompetente Zellen vorbereiten
- TSS-Puffer vorbereiten
- Chemisch kompetente Zellen transformieren
- Chemisch kompetente Zellen vorbereiten (Inoue )
- Transformieren chemisch kompetenter Zellen (Inoue)
- TOP10 chemisch kompetente Zellen
Vergleich chemischer Transformationspuffer
Jemand sollte Überprüfen Sie die Ansprüche von Nishimura90. tk 08:58, 25. September 2007 (EDT)
Rubidiumchlorid-Transformationsprotokoll hier
Jemand sollte die Behauptungen der chemischen Kompetenz von 1e10 unter Verwendung von Protokollen mit 10% Ethanol und Calciumchlorid überprüfen hier.
Elektroporation
Wenn Sie vorhaben, Elektroporation zu verwenden, lesen Sie diese Seiten –
- Elektrokompetente Zellen
- Elektroporation
Alle Medline-Abstracts: PubMed | HubMed