Tato technika byla vyvinuta koncem 80. let a je účinnou metodou detekovat translokace (přesmyky mezi chromozomy).
Pro vývoj FISH bylo nutné izolovat každý lidský chromozom. Následně byla DNA z těchto chromozomů fragmentována a vložena do bakteriálních buněk, aby ji amplifikovala (produkovala mnoho kopií). Tímto způsobem lze získat velké množství kopií DNA z každého chromozomu.
Tyto amplifikované fragmenty DNA jsou označeny vhodnými fluorescenčními barvami (vyzařujícími světlo) a umožňují hybridizaci (připojení) k metafázovým chromozomům. . Fluorescenčně značené DNA se připojí k analogickým chromozomům, ze kterých byly odvozeny. (Fragmenty DNA se stejnými sekvencemi bází se vyznačují vzájemným navázáním.)
Tímto způsobem, pokud by část natřeného chromozomu (například žlutá) prošla výměnou s jiným, ne -barvené chromozomy (obarvené červeně), je možné detekovat aberaci (nazývanou reciproční translokace), protože aberantní chromozom obsahuje žluté i červené segmenty. Obvykle lze v jedné metafázi detekovat dvojici dvoubarevných chromozomů, protože dva chromozomy si obvykle vyměňují část své DNA.
Reciproční translokace je obtížné zjistit jednoduchým obarvením celé sady chromozomů jediným materiál, například s Giemsou. Představte si například případ, kdy oba vyměněné segmenty měly podobné délky. Tyto dva translokované chromozomy by měly vypadat naprosto normálně, a to jak tvarem, tak délkou. Pokud však použijeme FISH, lze takovou translokaci jasně detekovat.
Obrázek. Příklad metafázových chromozomů ošetřených FISH
Zde byly chromozomy 1, 2 a 4 označeny žlutě pomocí FISH a ostatní chromozomy byly zabarveny červeně. Jsou detekovány translokace mezi žlutými a červenými chromozomy. Levý obrázek představuje normální buňku (čísla na obrázku označují čísla chromozomů) a pravý obrázek je příkladem vzájemné translokace se dvěma dvoubarevnými chromozomy (označenými dvěma šipkami).