Diskuse:
Jak již bylo krátce zmíněno, terapie založené na kmenových buňkách zahrnují tři odlišné prospektivní mechanismy: transplantaci multipotentního kmene buňky z různých zdrojů, aplikace CM odvozených z kmenových buněk a aplikace exosomů odvozených z kmenových buněk9. V tomto dokumentu se budeme každému z nich věnovat individuálně tím, že probereme současné klinické studie, jejich výsledky, příslušné výhody a omezení.
Transplantace multipotentních kmenových buněk se stala dobře přijímanou možností léčby vypadávání vlasů (zejména AGA) . Zdroje multipotentních kmenových buněk s regeneračním potenciálem vlasových folikulů v kůži zahrnují tukovou tkáň10, kostní dřeň11, vlasové folikuly z nepostižených oblastí12 a pupečníkovou krev13.
Owczarczyk-Saczonek et al8 poskytují důkladný přehled předklinické objevy slibných výsledků a výhod transplantačních terapií založených na kmenových buňkách. Výsledky klinických studií jsou dále diskutovány níže.
Elmaadawi et al14 studovali bezpečnost a účinnost autologních mononukleárních buněk odvozených z kostní dřeně (BMMC) včetně kmenových buněk ve srovnání s folikulárními kmenovými buňkami (FSC) získanými z neovlivněné oblasti pokožky hlavy u 20 pacientů s alopecia areata (AA) a 20 pacientů s AGA. Všichni pacienti podstoupili jedno ošetření autologními kmenovými buňkami (BMMC nebo FSC), které byly injikovány intradermálně. Vyhodnocení imunoznačením a digitální dermoskopií 6 měsíců po ošetření prokázalo významné zlepšení obou stavů bez významného rozdílu mezi léčenými skupinami a bez nežádoucích účinků.
Rigenera® je technologie, která získává autologní zralé kmenové buňky z biopsií pacient využívající systém přípravy pro mechanický rozpad a filtraci pevných tkání. Ve studii byla buněčná suspenze injikována do pokožky hlavy 11 pacientů postižených AGA. 23 týdnů po léčbě došlo k 29% ± 5% zvýšení hustoty vlasů v oblasti pokožky hlavy, která byla léčena, ve srovnání s oblastí, která dostávala placebo15. Gentile et al15 navrhli, že pomocí této nově objevené metody lze izolovat HFSC odvozené od vyboulení, aby se zabránilo problémům spojeným s kultivací buněk a co je důležitější, že mají schopnost zvýšit hustotu vlasů u pacientů s AGA.
Multipotentní kmen buňky pocházející z tukové tkáně – stromální vaskulární buňky odvozené z tukové tkáně (ADSVC) nebo regenerační buňky odvozené z tukové tkáně (ADRC) odkazují na čerstvě použité primární multipotentní kmenové buňky odvozené ze stromální vaskulární frakce. Když jsou tyto buňky kultivovány, dosahují dalších vlastností a stávají se populací mezenchymálních kmenových buněk (MSC), které se označují jako kmenové buňky odvozené z tukové tkáně (ADSC) 16, 17. Anderi et al16 studovali ADSVC celkem u 20 pacientů trpících z AA16. Statisticky významné zlepšení tloušťky vlasů nastalo zejména 6 měsíců po ošetření. Pouze 1 z 20 pacientů neprokázalo žádné zvětšení průměru vlasů. Dále došlo ke statisticky významnému zvýšení hustoty vlasů 3 a 6 měsíců po ošetření; 18 z 20 pacientů prokázalo zlepšení, zatímco pouze 2 z 20 pacientů nevykázali žádné zvýšení hustoty vlasů. Nakonec došlo také ke statisticky významnému snížení výsledků testů na tahání za vlasy 3 a 6 měsíců po ošetření; pouze 2 z 20 pacientů neprokázali žádné snížení skóre testu na tahání za vlasy. Anderi a kol.16 navrhli autologní štěpy ADSVC jako bezpečný a účinný způsob léčby AA.
Zanzottera a kol. 10 využili zařízení Rigenera® k přípravě autologních ADMSC získaných během transplantace vlasů. Suspenze byla poté aplikována na oblasti pokožky hlavy podstupující transplantaci vlasů u 3 pacientů trpících AGA. Měsíční sledování odhalilo rychlejší hojení ran způsobených transplantací. Kromě toho došlo k neustálému zlepšování růstu vlasů a kratší telogenní fázi dva měsíce po ošetření.
Další studie zjistila přínos primárních pluripotentních ADRC ve zvýšení růstu vlasů. Zejména přidání kmenových buněk derivovaných ze stromální vaskulární frakce do tukové tkáně při transplantačním zákroku zahrnujícím 6 pacientů trpících mužským nebo ženským PHL prokázalo statisticky významné 23% zvýšení průměrného počtu vlasů ve srovnání s 7,5% zvýšením u pacientů léčených tukovou tkání alone17.
Oblast dermální papily (DP) je důležitou oblastí vlasového folikulu, která obsahuje MSC a podílí se na vyvolání růstu vlasů a kontrole vlasového cyklu. DP buňky jsou obklopeny buňkami dermální pochvy (DSC), které jsou nezbytné pro regeneraci a proliferaci DP buněk, a tedy i pro růst vlasů18. Předpokládá se, že cirkulující androgeny deregulují signalizaci odvozenou od DP buněk, což vede k inhibici kanonické dráhy Wnt-β-katenin a ztrátě vlasů v AGA4.Kromě buněk DP se předpokládá, že multipotentní kmenové buňky z vyduté oblasti závisí také na buňkách DSC19. Ve studii Tsuboi et al20 dostalo 50 mužů a 15 pacientek jednorázovou injekci autologních DSC buněk v koncentracích 7,5 × 106, 1,5 × 106 nebo 3,0 × 105 DSC buněk nebo placebo ve 4 randomizovaných charakteristických oblastech pokožky hlavy a bylo sledování 3, 6, 9 a 12 měsíců po léčbě. Došlo k významnému zvýšení celkové hustoty vlasů a kumulativního průměru vlasů v místě injekce buněk 3,0 × 105 DSC 6 a 9 měsíců po ošetření. Tyto výsledky naznačují, že autologní injekce buněk DSC při minimální koncentraci je potenciálním bezpečným a užitečným doplňkovým způsobem léčby PHL jak u mužů, tak u žen.
Nové zaměření se zaměřuje na bioaktivní molekuly vylučované kmenovými buňkami, jako jsou jako růstové faktory, cytokiny, chemokiny a další, jako potenciální klíčové regulátory cyklu a regenerace vlasových folikulů9. Předpokládá se zejména, že až 80% regeneračních vlastností transplantovaných kmenových buněk pochází ze signalizace parakrinního faktoru21, 22. Kmenové buňky vylučují takové faktory, včetně nukleových kyselin, extracelulárních vezikul (včetně exosomů) a proteinů, čímž indukují parakrinní signalizaci23, 24. Tyto faktory jsou složkami sekretomu. Jinými slovy, sekretom představuje sadu signálních molekul včetně nukleových kyselin, extracelulárních vezikul a proteinů vylučovaných kmenovými buňkami. Pokud je sekretomát odvozený z kmenových buněk přítomen v médiu bohatém na živiny, je označován jako „podmíněné médium“ odvozené od kmenových buněk (CM) 25.
Několik studií zaměřených konkrétně na schopnost mimobuněčná matrice (EM) k vyvolání regenerace vlasů je k dispozici a celkově jsou jejich výsledky slibné 9. Navíc ve srovnání s jinými způsoby poskytuje CM odvozené z kmenových buněk další výhody. Například shoda dárce – příjemce, která je obvykle vyžadována buněčný typ léčby je s CM překonán, protože představuje bezbuněčné médium26. Navíc se zdá, že existuje menší riziko vývoje nádoru, stejně jako výhody snazší přípravy a nižší náklady27, 28. Ačkoli CM- odvozený z kmenových buněk Léčba založená na léčbě je na počátku, mnoho předklinických9 a několik klinických studií ukázaly povzbudivé výsledky. O klinických studiích pojednáme níže.
Fukuoka et al29 hodnotili účinnost a bezpečnost ADSC-CM u 25 pacientů (12 jo muži a 13 mužů) s diagnostikovanou ženskou nebo mužskou PHL; 1 pacient dostal diagnózu AGA i AA. V této studii byly ADSC předběžně ošetřeny za hypoxických podmínek, u kterých se dříve prokázalo, že mají schopnost indukovat sekreci různých růstových faktorů a cytokinů s potenciálním přínosem pro opětovný růst vlasů ve srovnání s normoxickými ADSC29, 30. Sekretom odvozený od ADSC se skládá z hepatocytů růstový faktor, vaskulární endoteliální růstový faktor, růstový faktor keratinocytů a růstový faktor odvozený z krevních destiček29. Toto médium bylo aplikováno každé 3–5 týdny s využitím metod injekce nappage a papule. Všichni pacienti prokázali staticky významné zlepšení růstu vlasů; Nejlepší výsledky vedly 4 léčebná sezení během 3–4měsíčního období29.
V jiné studii stejné skupiny na 22 pacientech (11 mužů a 11 žen) s alopecií dostávali injekce ADSC-CM každé 3 –5 týdnů, celkem tedy 6 sezení. 10 pacientů (8 mužů a 2 ženy) bylo také součástí srovnávací studie z poloviny. Hodnocení trichogramu před a po léčbě prokázalo statisticky významné zvýšení počtu vlasů u obou pohlaví. Ve srovnávací studii na polovině strany vykazovala léčba léčená stranou významný nárůst počtu vlasů ve srovnání se stranou placeba31. Nežádoucí účinky zahrnovaly post-procedurální bolest, která negativně ovlivňovala dodržování předpisů pacienty.
ADSC-CM byl také hodnocen u 27 pacientek trpících FPHL. Tato skupina využila mikrojehlový váleček k aplikaci ADSC-CM týdně po dobu 12 po sobě jdoucích týdnů. Fototrichografická analýza odhalila statisticky významné zvýšení hustoty a tloušťky vlasů a žádné nežádoucí účinky (včetně bolesti) 32.
Narita a kol. 33 hodnotili účinnost ADSC-CM u celkem 40 pacientů (21 mužů a 19 žen) s diagnózou alopecie33. Pacienti podstoupili intradermální injekce ADSC-CM měsíčně po dobu celkem 6 měsíců a měli kontrolní hodnocení před a 2, 4 a 6 měsíců po léčbě. V této studii došlo k významnému zvýšení hustoty vlasů a rychlosti anagenního ochlupení, jakož i dermální echogenity a dermální tloušťky ošetřené pokožky hlavy.
CM nepochybně ukazuje potenciál jako budoucí terapii opětovného růstu vlasů; jako každá modalita léčby však představuje určitá omezení. Zejména typ a úroveň faktorů přítomných v CM odvozených z kmenových buněk mohou být vysoce variabilní a pro zlepšení klinického použití a výsledků bude nanejvýš důležitá standardizace jeho přípravy22.Rychlý obrat a vyčerpání faktorů CM in vivo může navíc vyžadovat velká množství a časté aplikace34, 35. Nyní stručně probereme jednu konkrétní složku CM, která je považována za další alternativní terapeutický přístup založený na kmenových buňkách: exosom.
Exosomy jsou extracelulární vezikuly nejmenší velikosti, které fungují jako transportéry a posly mezi buňkami nesením signálních molekul včetně transkripčních faktorů, cytokinů a RNA22, 36, 37. Exosomy byly prokázány jako důležité modulátory parakrinu signalizace a zejména exosomy odvozené od DP buněk by mohly mít zásadní význam pro regeneraci vlasových folikulů38. Mnoho předklinických studií ukazuje příznivé výsledky; v současné době však neexistují žádné klinické studie využívající extracelulární vezikuly nebo exosomovou terapii pro růst vlasů9. K další charakteristice exosomů jako nové regenerační léčby vypadávání vlasů jsou zapotřebí preklinické a nové klinické studie.
Pro další dva terapeutické přístupy založené na kmenových buňkách jsou podporovány důkladnější studie: transplantace na základě kmenových buněk a CM odvozené z kmenových buněk; v současné době probíhá několik klinických studií (identifikátory ClinicalTrials.gov: NCT01673789, NCT02865421, NCT03078686, NCT02849470, NCT03676400, NCT03662854, NCT 01501617). Několik výše zmíněných studií bylo dokončeno a čekají na výsledky.