Johdanto
Transformaatio on prosessi, jossa vieraita DNA: ta (esim. plasmidit, BAC) tuodaan bakteeriin. Bakteerisoluja, joihin ulkomainen DNA voidaan muuntaa, kutsutaan kompetenssiksi. Jotkut bakteerit ovat luonnostaan kompetentteja (esim. B. subtilis), kun taas toiset, kuten E. coli, eivät ole luonnostaan kompetentteja. Ei-kykenevät solut voidaan tehdä päteviksi ja sitten transformoida kahdella päämenetelmällä; kemiallinen muunnos ja elektroporaatio.
Molemmilla muunnosmenetelmillä on etuja ja haittoja. Yleensä kemiallinen transformaatio on vähemmän alttiita virheille ja nopeampi, mutta elektroporaatio tuottaa korkeamman transformaatiotehokkuuden (osa transformoiduista soluista, jotka todella ottavat vieraan DNA: n). Katso kattavampi keskustelu molemmista lähestymistavoista kohdasta Kloonaus.
Protokollat
OpenWetWaressa on jo useita bakteerien transformaatioon liittyviä protokollia, mutta enemmän on aina tervetullut.
Jos jos käytät muunnosta jossakin näistä protokollista, lisää rohkeasti linkki protokollallesi yhdeltä näistä sivuista, jotta muut käyttäjät voivat löytää heille sopivan protokollan. Jos joku käyttää tehokkaita Innoe- tai Hanahan-protokollia, lisää protokollat tähän.
Kemiallinen muutos
Jos aiot tehdä kemiallisen muunnoksen, sinun pitäisi nähdä nämä sivut –
- kemiallisesti pätevien solujen valmistaminen
- TSS-puskurin valmistelu
- kemiallisesti pätevien solujen transformointi
- kemiallisesti kykenevien solujen valmistaminen (Inoue )
- Kemiallisesti pätevien solujen transformaatio (Inoue)
- TOP10 kemiallisesti pätevien solujen
Kemiallisen transformaation puskurin vertailu
Joku tutustu Nishimura90: n vaatimuksiin. tk 08:58, 25. syyskuuta 2007 (EDT)
Rubidiumkloridimuunnosprotokolla täällä
Joku tarkistaa 1e10 kemiallisen osaamisen väitteet käyttämällä 10% etanoli- ja kalsiumkloridiprotokollia täällä.
Elektroporaatio
Jos aiot käyttää elektroporointia, katso nämä sivut –
- Sähkökompetentit solut
- Elektroporaatio
Kaikki Medline-tiivistelmät: PubMed | HubMed