導入
形質転換は、外来DNA(プラスミド、BACなど)を細菌に導入するプロセスです。外来DNAを形質転換できる細菌細胞はコンピテントと呼ばれます。一部の細菌は自然にコンピテントセル(B. subtilisなど)ですが、大腸菌などの他の細菌は自然にコンピテントセルではありません。コンピテントでない細胞は、コンピテントにすることができ、2つの主要なアプローチのいずれかを介して形質転換することができます。化学変換とエレクトロポレーション。
両方の変換方法には長所と短所があります。一般に、化学形質転換はエラーが発生しにくく、高速ですが、エレクトロポレーションはより高い形質転換効率(実際に外来DNAを取り込む形質転換細胞の割合)を生成します。両方のアプローチの詳細については、クローニングを参照してください。
プロトコル
OpenWetWareには、細菌の形質転換に関連するプロトコルがすでに多数ありますが、それ以上のプロトコルをいつでも歓迎します。
これらのプロトコルのいずれかでバリアントを使用する場合は、これらのページのいずれかからプロトコルへのリンクを自由に追加して、他のユーザーが自分に適したプロトコルを見つけられるようにしてください。さらに、誰かがイノエまたはハナハンの高効率プロトコルを使用している場合は、ここにプロトコルを追加してください。
化学変換
化学変換を行う予定の場合は、次のように表示されます。ページ-
- 化学コンピテントセルの準備
- TSSバッファーの準備
- 化学コンピテントセルの形質転換
- 化学コンピテントセルの準備(井上)
- 形質転換化学コンピテントセル(井上)
- TOP10化学コンピテントセル
化学形質転換バッファーの比較
誰かがすべき西村90の主張をチェックしてください。 tk 08:58、2007年9月25日(EDT)
塩化ルビジウム変換プロトコルはこちら
誰かが10%エタノールおよび塩化カルシウムプロトコルを使用して1e10の化学的能力の主張を確認する必要がありますこちら。
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションの使用を計画している場合は、次のページを参照してください-
- エレクトロコンピテントセル
- エレクトロポレーション
すべてのMedlineアブストラクト:PubMed | HubMed