4-ORIGINAL ARTICLE MODELS, BIOLOGICAL
피임 효과 실험적 자궁 내막증을 가진 쥐의 Uncaria tomentosa (고양이 발톱)
Efeito anticoncepcional da Uncaria tomentosa (unha-de-gato) em ratas com endometriose experiment
João Nogueira NetoI; Frederico Lucas Lima Paiva CavalcanteII; Rafael Antonio Freire CarvalhoII; Taciana Gabrielle Pinheiro de Moura RodriguesII; Mariana Santana XavierII; Pablo Gustavo Ribeiro FurtadoIII; Eduardo SchorIV
Fellow PhD, Federal University of Sao Paulo (UNIFESP) and Unit of Endometriosis and Surgical Laboratory, HU-UFMA, Maranhao, Brazil. 기술 절차와 관련된 프로토콜을 설계하고, 원고 작성을 담당하고, 연구의 지적 및 과학적 내용을 담당하고, 연구의 모든 단계를 감독하고, 외과 개입에 대한 지침을 제공했습니다.
IIGraduate 학생, Federal University of Maranhao (UFMA) , 브라질. 기술 절차에 관여하며, 원고 준비
IIIMD, 병리학과, HU-UFMA, Maranhao, Brazil. 거시 및 조직 병리 검사
IVPhD, UNIFESP, 상파울루 부교수 및 브라질 파울리스타 의과 대학 (EPM-UNIFESP) 골반 통증 및 자궁 내막증 부서장. 데이터 수집 및 해석을 담당하고, 기술 절차를 지원하며, 외과 적 개입에 대한 지침을 제공합니다.
서신
요약
목적 : 실질의 조직 학적 변화를 평가합니다. Uncaria tomentosa 추출물로 치료 한 자궁 내막증이 유발 된 쥐의 자궁과 난소의 상피층.
방법 : 실험적 자궁 내막증이있는 29 마리의 쥐를 선별하여 세 그룹으로 나누었습니다 : Uncaria 그룹은 Uncaria tomentosa 추출물 32mg / ml, 1 일 1ml 투여, 위약 그룹은 14 일 동안 하루 1ml의 식염수 0.9 %를 투여 받았습니다. 일 (두 그룹 모두); 류 프롤 라이드 그룹은 류 프롤 라이드 아세테이트 1mg / kg 체중을 단일 피하 투여 량으로 투여 받았다. 치료 15 일째에는 조직 병리학 적 분석을 위해 자궁 각과 난소를 제거했습니다.
결과 : uncaria 그룹은 미성숙 난포가있는 9 개의 샘플 (90 %)을 제시 한 반면, 위약 그룹은 어떤 사례도 나타나지 않았으며, leuprolide 그룹에서는 동일한 변화를 보이는 8 마리의 쥐 (88 %)가있었습니다. 위약 그룹은 모든 동물에서 성숙한 황체를 보였으며, uncaria (10 %) 및 leuprolide (22 %) 그룹에서는 덜 발생했습니다. 자궁 상피는 uncaria 그룹의 9 개 (90 %) 샘플, 위약 그룹의 2 마리 (20 %) 동물 및 leuprolide 그룹의 7 마리 (77.8 %) 래트에서 약한 증식을 나타냈다.
결론 :이 발견은 Uncaria tomentosa가 피임 효과가 있음을 시사합니다.
핵심 단어 : 자궁 내막증. 식물 요법. 피임. 쥐.
RESUMO
OBJETIVO : Avaliação histológica do útero e parênquima ovariano de ratas com endometriose induzida tratadas com extrato de Uncaria tomentosa.
MÉTODOS : Foram selecionadas 29 ratas com endometriose experiment e formados três grupos : O grupo uncaria recebeu extrato de Uncaria tomentosa com 32mg / ml, administrado 1ml ao dia eo grupo placebo recebeu 1ml de solução salina a 0,9 %, ambos por 14 dias; o grupo leuprolida recebeu acetato de leuprolida 1mg / kg de peso corporal aplicado via subcutânea dose única. 15 ° dia de tratamento realizou-se retirada de corno uterino e ovários para análise histopatológica.
결과 : O grupo uncaria apresentou nove amostras (90 %) com maturação incompleta dos folículos ovarianos, já o grupo placebo não apresentou nenhum caso e no grupo leuprolida houve oito ratas (88 %) com a mesma alteração. O grupo placebo apresentou corpo lúteo maduro em todos os animais, acontecendo de forma menos freqüente nos grupos uncaria (10 %) e leuprolida (22 %). O epitélio uterino se mostrou fracamente proliferativo em nove (90 %) das amostras do grupo unacaria, em dois (20 %) casos do grupo placebo e sete (77.8 %) casos no grupo leuprolida.
결론 : Os achados sugerem que a Uncaria tomentosa tem efeito anticoncepcional.
설명 : 자궁 내막증. Fitoterapia. Anticoncepção. Ratos.
소개
자궁 내막증은 자궁강 외부의 자궁 내막 조직과 구조적 및 기능적으로 유사한 조직의 존재를 특징으로하는 질병으로, 삶의 질과 생식에 영향을 미칩니다. 환자의 능력. 일반적으로 복막, 난소, 나팔관, 자궁 및 fornix Douglas1,2와 같은 골반 기관에서 발생합니다.
자궁 내막증의 발병률은 생식 연령 여성의 약 10 % 정도로 높습니다. 이 병리학은 염증 및 면역 조절 활동뿐만 아니라 세포 사멸 및 산화 스트레스의 불균형뿐만 아니라 에스트로겐 반응 질환처럼 행동합니다.
자궁 내막증의 치료는 외과 적 또는 임상 적 치료가 될 수 있으며, 일반적인 약물 요법은 의사 임신, 의사 폐경 또는 만성 무배란을 유도하는 정상적인 월경주기를 방해하여 임상 적 개선을 제공하는 것입니다. 그러나 그 효과는 치유 적이 지 않으며 잦은 재발로 인해 새로운 치료법을 찾는 것을 정당화합니다 6.
고양이의 발톱으로 널리 알려진 Uncaria tomentosa는 열대 지방에서 흔히 볼 수있는 Rubiaceae 계통에 속합니다. 남미와 중미.이 식물은 추출물 형태로 원주민에 의해 널리 사용되며 다양한 질병의 대체 치료제로 자주 사용됩니다. 연구에 따르면 고양이의 발톱에는 항 염증, 면역 조절, 세포 자멸 촉진 효과가 있습니다. 자궁 내막증을 치료할 수있는 가능한 대안을 정당화하기위한 항산화 제와 피임 효과가 있습니다 7,8.
이 연구의 목적은 자궁의 실질 상피층의 조직 학적 변화를 평가하는 것이 었습니다. 자궁 내막증이 유발 된 쥐의 난소를 Uncaria tomentosa 수성 추출물 (cat “s claw)로 처리했습니다.
방법
이 실험 연구는 2011 년 4 월과 5 월 사이에 완료되었습니다. 40 Wistar 쥐 (Rattus norvegicus albinos) 성인, 암컷, UFMA (Federal University of Maranhão)의 Bioterium에서 제공 한 60 일령 180 ~ 250g의 처녀.
이 연구는 University Hospital of the University Hospital의 실험 수술 실험실에서 수행되었습니다. Maranhão 연방 대학. 실험 동물 사용에 대한 브라질 법규 (Arouca 법률 No. 11,794 / 2008)와 국제 실험 동물 과학 협의회 산하 기관인 브라질 동물 실험 대학 (COBEA)에서 정한 표준을 따랐습니다. 이 연구는 프로토콜 번호 2011 년 1 월 1 일에 따라 동물 실험 윤리위원회 (CEEA-UEMA)의 승인을 받았습니다.
동물은 46cm x 31cm x 크기의 스테인리스 스틸 그릴 덮개가있는 폴리 프로필렌 케이지 당 5 마리로 분류되었습니다. 바닥이 나무 부스러기로 덮인 16cm, 48 시간마다 교체. 동물은 일정한 환경 조건하에 유지되었고, 쥐 사료 (Purina®, 브라질 상파울루) 및 7 일 동안 물을 임의로 수용하여 소음 제어, 온도 22 ° C ± 2 ° C, 상대 습도 40 % 60 %, 12/12 시간의 명암주기.
자궁 내막증의 유도는 Nogueira Neto 등이 제안한 방법론에 따라 수행되었습니다. 첫 수술 후 21 일이 지난 후 쥐는 다시 추가 수술을 받았으며, 이때 디지털 후피 미터로자가 이식 초점을 식별 및 측정하여 복강의 목록을 작성하고 다음의 정도 분류 시스템을 사용하여 부피를 계산했습니다. Quereda et al. 10에 따른 성장 임플란트. 성장 수준이 2, 3 인 사람 만 연구에 남았습니다.
쥐는 무작위로 3 개의 그룹으로 나뉩니다. 각 동물은 꼬리에 4mm 영구 브러시 (Pilot®, 브라질 상파울루)로 표시하고 새장을 식별했습니다. 위관 영양의 시작은 자궁 내막증 유도 수술 후 22 일부터 시작되었습니다.
그룹은 다음과 같이 나누어졌습니다. 그룹 Uncaria는 32mg / ml Uncaria tomentosa 추출물 (Cat “s Claw 100mg, Herbarium of 브라질), 하루에 1ml를 투여하고 위약 그룹은 Nogueira Neto 등 9에 따라 14 일 동안 1ml의 식염수 0.9 %로 매일 위관 영양을 공급 받았습니다. 류 프롤 라이드 그룹은 1mg / kg 체중의 류 프롤 라이드 아세테이트를 투여 받았습니다 (LupronTM 3, 75mg, ABBOTT of Brazil) 단일 피하 용량 11.
실험 약물은 고양이 발톱 추출물 (Uncaria tomentosa) 16g과 0.9 % 식염수 500ml로 구성되어 있습니다. 캣츠 클로 추출물 100mg (Cat ‘s Claw 100mg, Herbarium of Brazil) 160 정을 유봉과 함께 자기 절구에 분쇄 한 후 500ml 0.9 % NaCl에 용해시켜 가공을 진행 하였다. 비커에 넣고 부드러워 질 때까지 섞습니다. 혼합물은 평균 15 분 동안 만들어졌으며 총 부피는 32mg / ml 농도의 현탁액에 500ml였습니다 9.
치료 종료 후 새로운 수술을했고 이때 , 복강의 목록이 다시 작성되었습니다. 나머지 오른쪽 자궁 각과 두 난소는 조직 학적 평가를 위해 제거되었습니다. 제거 된 부품은 0.9 % 식염수 용액으로 세척하고 10 % 완충 포르말린이 담긴 용기에 보관하여 신원을 확인하고 Maranhão 연방 대학 대학 병원의 병리학과로 전달했습니다. 조직 절편을 만들고 헤 마톡 실린-에오신 (HE)으로 염색했습니다.
각 그룹의 동물은 치료 시작 후 15 일에 죽였습니다. 체중 후, 복강 투여를 통해 150mg / kg의 티 오펜 탈 나트륨 (Thiopental®, Crystal, St. Paul)을 투여 받았습니다.2002 년 6 월 20 일 연방 수의학위원회 (CFMV) 결의 번호 714에 따라 약물을 동일한 부피의 식염수로 희석했습니다. 사망은 심장 호흡 정지와 반사가 전혀없는 것이 특징입니다.
데이터 분석은 Mukherji와 Bhowmik12에 따른 조직 학적 발견을 기반으로 한 설명 적이었습니다.
결과
40 마리 쥐의 초기 샘플에서 10 명은 자궁 내막증 등급 2와 3이 발생하지 않았고, 1 마리는 위관 영양 중 흡인으로 인해 제외되었습니다. 최종 샘플은 29 마리의 쥐를 위해 구성되었으며, 세 그룹으로 나뉘어졌습니다. 그리고 9 마리의 쥐가있는 류 프롤 리드 그룹.
Uncaria tomentosa (Uncaria 그룹)로 치료를받은 그룹은 9 예 (90 %)에서 미성숙 난포 (표 1 및 그림 1), 완전 성숙하고 성숙 된 난포를 나타 냈습니다. 황체 (표 2)는 한 경우 (10 %)에 존재합니다.
자궁 조직학 (표 3)은 9 개 샘플 (90 개)에서 약하게 증식하는 자궁 내막 (그림 2)을 보여주었습니다. %).
위약 그룹은 모든 경우에 완전한 성숙과 성숙한 황체를 가진 난포를 가졌다 (100 %). 자궁 내막과 관련하여 8 예 (80 %)에서 증식했습니다.
류 프롤 라이드 그룹은 모든 샘플에서 미성숙 난포를 보였고 8 개 샘플 (88 %)에서 황체가 위축되었습니다. 자궁 내막은 2 예 (22.2 %)에서 위축 (그림 3), 7 예 (77.8 %)에서 약하게 증식했습니다.
토론
자궁 내막증을 치료하기위한 약초 사용에 대한 임상 및 실험 데이터를 사용한 연구에서 항 염증, 진통제, 면역 조절 및 항산화 특성을 가진 여러 약물이이 질병을 퇴치하는 데 효과적이라고보고했습니다. 여성의 자궁 내막증 치료를 위해서는 허브의 효과에 대한 새로운 임상 연구가 필요합니다 13. 이러한 의미에서 유럽 인간 생식 및 발생학 학회에서 실시한 자궁 내막증 진단 및 치료를위한 증거 가이드는 자궁 내막증 치료에 약초 사용에 대해 D 등급의 권장 정도를 고려합니다. 즉, 증거가 없습니다. 이러한 치료를 지원하기 위해이 사회는이 약초를 사용하는 일부 여성에서 통증이 감소하고 삶의 질이 향상 되었기 때문에 약초를 버리지 말 것을 권장합니다. 또한 고양이의 발톱은 이미 FDA (식품의 약국)와 같은 기관에서 식품 보충제로 사용을 승인했다는 사실을 알고 있습니다.
염증 변화가있는 생리 병리학에 대한 자궁 내막증 지식, 아폽토시스 , 면역 조절 및 항산화 제는 위에서 언급 한 이러한 변화의 부작용이있는 작용 메커니즘을 가진 약물을 실험적으로 사용할 수있는 기반을 제공했습니다.이 추출물을 사용한 실험 연구에서는 자궁 내막 초점이 현저히 감소한 것으로 나타났습니다 9.
고양이의 발톱은 자궁 내막증을 실험적으로 감소 시키며,이 병리의 치료를위한 Uncaria tomentosa 작용 메커니즘을 평가할 필요가 있습니다. 자궁 내막증 치료에 일반적으로 사용되는 약물 중에는 자궁 내막증에 대해 알려진 작용을하는 피임약이 있습니다. 유방 종양 조직의 체외 배양 평가에서 (침윤성 유관 암종, 2 기 및 잘 분화되지 않은) Uncaria tomentosa를 사용하고 메토트렉세이트와 비교하여이 약초로 인한 에스트로겐 수용체의 특정 영역이 감소하는 것으로 관찰되었습니다. Uncaria tomentosa에 대한 피임 조치 15.이 전제에 근거하여 고양이 발톱의 피임 효과를 평가하는 데 필요하게되었습니다.
피임 효과를 평가하기 위해 선택한 조직 학적 매개 변수는 조사한 연구를 기반으로 만들어졌습니다. 다른 용량의 쥐에서 근육 내 메드 록시-프로게스테론을 사용한 후 시료의 난소와 자궁 상피층의 조직 학적 분석 12. 실험, 양성 및 음성 대조군의 세 그룹으로 구성되었습니다. 실험 그룹 (Uncaria 그룹)이 사용했습니다. Uncaria tomentosa 추출물 32mg / 일 및 음성 대조군 (위약군)은 Neto e 기준으로 매일 1ml의 식염수 0.9 %를 사용했습니다. t al.9, 명백한 임상 적 합병증없이 자궁 내막증의 유의 한 감소를 보여 주었다. 양성 대조군 (류 프롤 라이드 군)은 실험적 자궁 내막증에 대한 고용량 아토르바스타틴의 사용을 만족스러운 결과로 평가 한 Oktem et al.11에 근거하여 단일 피하 투여 량을 적용한 leuprolide acetate 1mg / kg 체중을 투여 받았습니다. leuprolide 아세테이트는 GnRH 유사체로 여성의 자궁 내막증에서 탁월한 결과를 보이지만 주로 골 손실과 갱년기 증상이 특징 인 부작용으로 인해 사용이 제한적입니다 14.
난소의 조직 학적 분석은 uncaria와 leuprolide 그룹에서 유사한 변화를 보였으며, 대부분의 샘플에서 황체와 원발성 난포의 위축이없는 것으로 나타 났으며 이는 난소 활동이 없음을 시사합니다. 자궁 상피층의 조직 학적 평가에서 Uncaria와 leuprolide 그룹은 다시 유사하게 수행되었으며, 이들의 샘플은 증식 단계에있는 모든 샘플이있는 위약 그룹에서 관찰 된 것과 달리 약하게 증식하는 상피층을 나타 냈습니다. Mukherji 및 Bhowmik12에 따르면 이러한 데이터는 피임과 호환됩니다.
결론
Uncaria tomentosa 추출물에 노출 된 실험적 자궁 내막증을 가진 쥐의 조직 병리학 적 소견을 고려하고 양성 및 음성 대조군과 비교 그룹의 경우 발견 된 변화가 피임과 호환되는 것이 좋습니다.
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이해 상충 : 없음
재정 출처 : 없음