Innledning
Transformasjon er prosessen med å introdusere fremmed DNA (f.eks. plasmider, BAC) i en bakterie. Bakterieceller som fremmed DNA kan transformeres til, kalles kompetente. Noen bakterier er naturlig kompetente (for eksempel B. subtilis), mens andre som E. coli ikke er naturlig kompetente. Ikke-kompetente celler kan gjøres kompetente og deretter transformeres via en av to hovedtilnærminger; kjemisk transformasjon og elektroporering.
Det er fordeler og ulemper ved begge transformasjonsmetodene. Generelt er kjemisk transformasjon mindre utsatt for feil og raskere, men elektroporering gir en høyere transformasjonseffektivitet (brøkdel av transformerte celler som faktisk tar opp det fremmede DNA). Se kloning for en mer fullstendig diskusjon av begge tilnærminger.
Protokoller
OpenWetWare har allerede en rekke protokoller knyttet til bakteriell transformasjon, men flere er alltid velkomne.
Hvis du bruker en variant på en av disse protokollene, vær så snill å legge til en lenke til protokollen din fra en av disse sidene, slik at andre brukere kan finne en protokoll som fungerer for dem. I tillegg, hvis noen bruker protokollene Innoe eller Hanahan med høy effektivitet, kan du legge til protokoller her.
Kjemisk transformasjon
Hvis du planlegger å gjøre en kjemisk transformasjon, bør du se disse sider –
- Klargjøre kjemisk kompetente celler
- Klargjøre TSS-buffer
- Transformere kjemisk kompetente celler
- Klargjøre kjemisk kompetente celler (Inoue )
- Transformere kjemisk kompetente celler (Inoue)
- TOP10 kjemisk kompetente celler
Sammenligning av kjemisk transformasjonsbuffer
Noen burde sjekk ut påstandene fra Nishimura90. tk 25. september 2007 (EDT) 08:58
Transformasjonsprotokoll for rubidiumklorid her
Noen bør sjekke påstandene om 1e10 kjemisk kompetanse ved hjelp av 10% etanol- og kalsiumkloridprotokoller her.
Elektroporation
Hvis du planlegger å bruke elektroporation, kan du se disse sidene –
- Elektrokompetente celler
- Elektroporation
Alle Medline-sammendrag: PubMed | HubMed