Publicado el 15 de julio de 2012 por Kelly Gleason en Lab Skills, Research
La investigación traslacional está encontrando su en todas las fases de los ensayos clínicos, lo que significa que cada vez más enfermeras de investigación se encuentran con la tarea de recolectar y procesar muestras. Estas muestras son recursos muy valiosos y cruciales para el éxito general de la investigación.
Esto requiere que muchas enfermeras investigadoras aprendan y desarrollen conocimientos y habilidades en el laboratorio, no solo para trabajar de manera segura en un entorno de laboratorio, sino también para mantener integridad de las muestras procesadas. Puede resultar desafiante y abrumador leer por primera vez las instrucciones y los manuales de laboratorio para guiarnos en el procesamiento de muestras. Cuando tiene suerte, el manual del laboratorio le indica la velocidad a la que sus muestras deben centrifugarse en el mismo idioma que habla su centrífuga, ya sea RPM o fuerza G. Pero, ¿qué haces cuando no es así? La respuesta es más fácil de lo que piensa…
La fuerza ejercida sobre una partícula en una centrífuga es una función simple de la velocidad de rotación de la centrífuga y el radio de rotación. La ecuación real es:
RCF o fuerza G = 1,12 x R x (RPM / 1000) ²
R es el radio de rotación medido en milímetros. Por ejemplo, en la fotografía de abajo, R es 240 mm.
R se puede medir en la parte superior del tubo (Rmin), la mitad del tubo (Rav) o la parte inferior del tubo (Rmax). Si su protocolo no lo especifica, puede usar choose, pero si está tratando de peletizar algo, probablemente debería usar Rmax ya que el pelet se forma en la parte inferior del tubo.
Sedimentación
Las partículas en suspensión se depositarán en el fondo de un recipiente con el tiempo, esto se llama sedimentación. Las partículas caen al fondo debido a la gravedad, de la misma manera que las hierbas en un aderezo para ensaladas se depositan en el fondo de la botella. Esta fuerza se expresa como G. La centrifugación aumenta la velocidad de sedimentación (es decir, la acumulación de glóbulos rojos y blancos en el fondo de un tubo de sangre) al hacer girar las muestras de sangre y crear una fuerza centrífuga que actúa sobre las partículas (en este caso, glóbulos rojos y blancos).
RPM significa ‘revoluciones por minuto’. Así es como los fabricantes de centrífugas generalmente describen qué tan rápido va la centrífuga (es decir, girando). El rotor, independientemente de su tamaño, gira a ese ritmo. Sin embargo, la fuerza aplicada al contenido varía según el tamaño de la centrífuga, ya que una centrífuga más grande tendrá un radio más largo y una centrífuga más pequeña tendrá un radio más corto.
Por ejemplo, cuando gira a 2000 RPM, una centrífuga más grande con una longitud de radio más larga hará girar las muestras a una fuerza g mayor que una centrífuga más pequeña con una longitud de radio más corta.
Si sabe a qué fuerza G necesita para girar sus muestras y puede medir el radio en su centrífuga, puede calcular la velocidad o las RPM que necesita para configurar su centrífuga utilizando un nomógrafo, como se establece a continuación.
También puede usar esta ecuación si no puede acceder a un nomograma .:
Fuerza G = 0.000001118 x R x RPM²
Cuando usted sabe la fuerza G a la que debe centrifugarse una muestra, puede medir el radio de su centrífuga y determinar las revoluciones por minuto a las que debe configurar su centrífuga.
El mensaje para llevar a casa es que las velocidades de centrifugacióncotizado en RPM solo será constante para centrífugas con los mismos radios de rotor. Si usa una configuración de RPM de un protocolo en el que alguien usó una centrífuga con un radio diferente al suyo, obtendrá una fuerza G diferente. A menudo, la diferencia no será lo suficientemente significativa como para afectar la muestra, pero siempre es una buena práctica estandarizar tanto como sea posible la forma en que se procesan las muestras en varias instituciones utilizando diferentes equipos.
La recolección y el procesamiento de muestras son aspectos muy importantes de la investigación clínica y las habilidades de la enfermera investigadora en el laboratorio son cruciales no solo para mantener una práctica segura sino también para garantizar la integridad de la muestra. Los resultados de los estudios dependen de la calidad de la recolección y el procesamiento de estas muestras y las buenas habilidades de laboratorio ayudan a las enfermeras investigadoras a lograrlo.
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