4 – MODELOS DE ARTÍCULO ORIGINAL, BIOLÓGICO
Efecto anticonceptivo de Uncaria tomentosa (uña de gato) en ratas con endometriosis experimental1
Efeito anticoncepcional de Uncaria tomentosa (unha-de-gato) em ratas com endometriose experimental
João Nogueira NetoI; Frederico Lucas Lima Paiva CavalcanteII; Rafael Antonio Freire CarvalhoII; Taciana Gabrielle Pinheiro de Moura RodriguesII; Mariana Santana XavierII; Pablo Gustavo Ribeiro FurtadoIII; Eduardo SchorIV
IFellow PhD, Universidad Federal de Sao Paulo (UNIFESP) y Unidad de Endometriosis y Laboratorio Quirúrgico, HU-UFMA, Maranhao, Brasil. Diseñó el protocolo, involucrado con los procedimientos técnicos, responsable de la redacción del manuscrito, responsable del contenido intelectual y científico del estudio, supervisó todas las fases del estudio, proporcionó las pautas para la intervención quirúrgica
Estudiante de grado II, Universidad Federal de Maranhao (UFMA) , Brasil. Implicado con los procedimientos técnicos, responsable de la preparación del manuscrito
IIIMD, Departamento de Patología, HU-UFMA, Maranhao, Brasil. Exámenes macroscópicos e histopatológicos
IVPhD, Profesor Afiliado, UNIFESP, Sao Paulo y Jefe de Unidad de Dolor Pélvico y Endometriosis de la Facultad de Medicina Paulista (EPM-UNIFESP), Brasil. Responsable de la adquisición e interpretación de datos, ayudado con los procedimientos técnicos, brindar pautas para las intervenciones quirúrgicas
Correspondencia
RESUMEN
PROPÓSITO: Evaluar los cambios histológicos en el parénquima Capa epitelial del útero y ovario de ratas con endometriosis inducida, tratadas con extracto de Uncaria tomentosa.
MÉTODOS: Se seleccionaron 29 ratas con endometriosis experimental y se dividieron en tres grupos: el grupo de uncaria recibió 32 mg / ml de extracto de Uncaria tomentosa, 1 ml administrado diariamente y el grupo placebo recibió 1 ml de solución salina al 0,9% por día, durante 14 días (ambos grupos); el grupo de leuprolida recibió acetato de leuprolida 1 mg / kg de peso corporal aplicado en una sola dosis subcutánea. En el día 15 de tratamiento se extrajeron el cuerno uterino y los ovarios para análisis histopatológico.
RESULTADOS: El grupo uncaria presentó nueve muestras (90%) con folículos ováricos inmaduros, mientras que el grupo placebo no presentó ningún caso y en el grupo leuprolide hubo ocho ratas (88%) con el mismo cambio. El grupo de placebo mostró cuerpo lúteo maduro en todos los animales, ocurriendo con menos frecuencia en los grupos de uncaria (10%) y leuprolida (22%). El epitelio uterino mostró una proliferación débil en nueve (90%) muestras del grupo de uncaria, en dos (20%) animales en el grupo de placebo y siete (77,8%) ratas en el grupo de leuprolida.
CONCLUSIONES: Los hallazgos sugieren que Uncaria tomentosa tiene efecto anticonceptivo.
Palabras clave: Endometriosis. Fitoterapia. Anticoncepción. Ratas.
RESUMO
OBJETIVO: Avaliação histológica do útero e parênquima ovariano de ratas com endometriose induzida tratadas com extrato de Uncaria tomentosa.
MÉTODOS: Foram selecionadas 29 ratas com endometriose experimental e formados três grupos: O grupo uncaria recebeu extrato de Uncaria tomentosa com 32mg / ml, administrado 1ml ao dia eo grupo placebo recebeu 1ml de solução salina a 0,9%, ambos por 14 días; o grupo leuprolida recebeu acetato de leuprolida 1mg / kg de peso corporal aplicado vía subcutânea dosis única. No 15 ° dia de tratamento realizou-se retirada de corno uterino e ovários para análise histopatológica.
RESULTADOS: O grupo uncaria apresentou nove amostras (90%) con maturação incompleta dos folículos ovarianos, já o grupo placebo não apresentou nenhum caso e no grupo leuprolida houve oito ratas (88%) com a mesma alteração. O grupo placebo apresentou corpo lúteo maduro em todos los animales, acontecendo de forma menos freqüente nos grupos uncaria (10%) e leuprolida (22%). O epitélio uterino se mostrou fracamente proliferativo em nove (90%) das amostras do grupo unacaria, em dois (20%) cases do group placebo e sete (77.8%) cases no grupo leuprolida.
CONCLUSÃO: Os achados sugerem que a Uncaria tomentosa tem efeito anticoncepcional.
Descritores: Endometriose. Fitoterapia. Anticoncepção. Ratos.
Introducción
La endometriosis es una enfermedad caracterizada por la presencia de tejido que es estructural y funcionalmente similar al tejido endometrial fuera de la cavidad uterina, lo que afecta la calidad de vida y la reproducción. capacidad de los pacientes. Por lo general, se desarrolla en los órganos pélvicos como el peritoneo, los ovarios, las trompas de Falopio, el útero y el fondo de saco Douglas1,2.
La incidencia de endometriosis es tan alta como alrededor del 10% de las mujeres en edad reproductiva. Esta patología se comporta como una enfermedad sensible a los estrógenos con actividades inflamatorias e inmunomoduladoras, así como desequilibrio de apoptosis celular y estrés oxidativo2-5.
El tratamiento de la endometriosis puede ser quirúrgico o clínico, cuya medicación habitual es aquella que interfiere en el ciclo menstrual normal induciendo pseudoembarazo, pseudomenopausia o anovulación crónica, aportando mejoría clínica. Sin embargo, sus efectos no son curativos, con frecuentes recurrencias, lo que justifica la búsqueda de nuevos tratamientos6.
La Uncaria tomentosa, conocida popularmente como uña de gato, pertenece a la familia de las Rubiaceae, comúnmente encontrada en zonas tropicales de América del Sur y Central. Esta planta, en forma de extracto, es ampliamente utilizada por los pueblos indígenas y se usa a menudo como un tratamiento alternativo para diversas enfermedades. Los estudios han demostrado que la uña de gato tiene propiedades antiinflamatorias, inmunomoduladoras, proapoptóticas y efecto antioxidante, así como anticonceptivo, para justificar una posible alternativa para tratar la endometriosis7,8.
El objetivo de este estudio fue evaluar los cambios histológicos en la capa epitelial del parénquima del útero y ovario de ratas con endometriosis inducida, tratadas con extracto acuoso de Uncaria tomentosa (uña de gato).
Métodos
Este estudio experimental se completó entre abril y mayo de 2011, con una muestra de 40 ratas Wistar (Rattus norvegicus albinos) adultas, hembras, virgen, con un peso entre 180 y 250 gramos, con 60 días de edad, proporcionada por el Bioterio de la Universidad Federal de Maranhão (UFMA).
Esta investigación se realizó en el Laboratorio de Cirugía Experimental del Hospital Universitario de la Universidad Federal de Maranhão. Siguió la legislación brasileña para el uso de animales de experimentación (Ley Arouca No. 11.794 / 2008) y los estándares establecidos por el Colegio Brasileño de Experimentación Animal (COBEA), una institución afiliada al Consejo Internacional de Ciencia Animal de Laboratorio. El estudio fue aprobado por el Comité de Ética en Experimentación Animal (CEEA-UEMA) bajo el número de protocolo 011/2011.
Los animales se agruparon cinco por jaula de polipropileno con rejilla de acero inoxidable, de 46 cm x 31 cm x 16 cm con el fondo cubierto de virutas de madera, cambio cada 48 horas. Los animales se mantuvieron en condiciones ambientales constantes, recibiendo pienso para ratas (Purina®, São Paulo, Brasil) y agua ad libitum siete días para la adaptación, con control de ruido, temperatura 22 ° C ± 2 ° C, humedad relativa 40% 60%, Ciclo de 12/12 horas luz / oscuridad.
La inducción de endometriosis se realizó según la metodología propuesta por Nogueira Neto et al.9. Transcurridos 21 días desde la primera cirugía, las ratas fueron sometidas nuevamente a una nueva cirugía, momento en el cual se realizó el inventario de la cavidad peritoneal con identificación y medición del foco de autotrasplante con un paquímetro digital, seguido del cálculo del volumen mediante el Sistema de Clasificación de Grados de Implantes de crecimiento de acuerdo con Quereda et al.10. Solo aquellos que han desarrollado el nivel de crecimiento dos y tres permanecieron en el estudio.
Las ratas se dividieron al azar en tres grupos. Se marcó cada animal en la cola con un cepillo permanente de cuatro mm (Pilot®, São Paulo, Brasil) y se identificaron las jaulas. El inicio de la sonda fue a partir del día 22 posquirúrgico de la inducción de la endometriosis.
Los grupos se dividieron de la siguiente manera: el grupo Uncaria recibió una sonda con 32 mg / ml de extracto de Uncaria tomentosa (uña de gato 100 mg, herbario de Brasil), se administró 1 ml por día, y el grupo placebo recibió una sonda diaria con 1 ml de solución salina al 0,9%, ambos durante 14 días según Nogueira Neto et al.9. El grupo de leuprolida recibió acetato de leuprolida 1 mg / kg de peso corporal (LupronTM 3, 75 mg, ABBOTT de Brasil) dosis única subcutánea 11.
El fármaco experimental está compuesto por 16 g de extracto de uña de gato (Uncaria tomentosa) y 500 ml de solución salina al 0,9%. El procesamiento se realizó moliendo 160 tabletas de 100 mg de extracto de uña de gato (Uña de gato 100 mg, Herbario de Brasil) en un mortero de porcelana con mano de mortero, y luego se procedió a su disolución en 500 ml de NaCl al 0,9%. en un vaso de precipitados para mezclar hasta que quede suave. La mezcla se realizó en un tiempo promedio de 15 minutos, y el volumen total fue de 500ml en suspensión con una concentración de 32mg / ml9.
Una vez finalizado el tratamiento se realizó una nueva cirugía y, en este momento , se realizó nuevamente el inventario de la cavidad peritoneal. El cuerno uterino derecho restante y ambos ovarios se extrajeron para evaluación histológica. Las piezas extraídas se limpiaron con solución salina al 0,9% y se almacenaron en un recipiente con formalina tamponada al 10%, recibiendo identificación y remitidas al Departamento de Patología del Hospital Universitario de la Universidad Federal de Maranhão. Se hicieron cortes de tejido y se tiñeron con hematoxilina-eosina (HE).
Los animales de cada grupo se sacrificaron el día 15 después del comienzo del tratamiento. Después del peso, se les ha administrado 150 mg / kg de tiopental sódico (Thiopental®, Crystal, St. Paul) por vía intraperitoneal.El fármaco se diluyó en igual volumen de solución salina, de acuerdo con la resolución Número 714 del 20 de junio de 2002 del Consejo Federal de Medicina Veterinaria (CFMV). La muerte se caracterizó por paro cardiorrespiratorio y ausencia total de reflejos.
El análisis de los datos fue descriptivo, basado en los hallazgos histológicos según Mukherji y Bhowmik12.
Resultados
De la muestra inicial de 40 ratas, diez fueron excluidas por no desarrollar endometriosis grados dos y tres, y una por aspiración durante la alimentación por sonda. La muestra final estuvo compuesta por 29 ratas, divididas en tres grupos: uncaria y placebo, ambos con diez animales; y grupo de leuprolida con nueve ratas.
El grupo en tratamiento con Uncaria tomentosa (grupo Uncaria) reveló folículos inmaduros (Tabla 1 y Figura 1) en nueve casos (90%), y folículos con maduración completa y maduros el cuerpo lúteo (Tabla 2) está presente en un caso (10%).
La histología uterina (Tabla 3) mostró endometrio de proliferación débil (Figura 2) en nueve muestras (90 %).
El placebo grupo tenía folículos con maduración completa y cuerpo lúteo maduro en todos los casos (100%). En relación al endometrio, fue proliferativo en ocho casos (80%).
El grupo de leuprolida tuvo folículos inmaduros en todas las muestras y cuerpo lúteo atrofiado en ocho muestras (88%). El endometrio estaba atrofiado (Figura 3) en dos casos (22,2%) y débilmente proliferativo en siete casos (77,8%).
Discusión
Estudios con datos clínicos y experimentales sobre el uso de hierbas medicinales para el tratamiento de la endometriosis, informaron que varios fármacos con propiedades antiinflamatorias, analgésicas, inmunomoduladoras y antioxidantes son eficaces en el combate de esta enfermedad. Se necesitan nuevos estudios clínicos sobre la eficacia de las hierbas para el tratamiento de la endometriosis en mujeres13. En este sentido, la guía de evidencia para el diagnóstico y tratamiento de la endometriosis realizada por la Sociedad Europea de Reproducción Humana y Embriología, considera un grado de recomendación de grado D para el uso de hierbas medicinales en el tratamiento de la endometriosis, es decir, no existe evidencia para apoyar estos tratamientos, pero esta sociedad recomienda que las medicinas a base de hierbas no deben descartarse porque en algunas mujeres que usaron estas hierbas se ha notado una disminución del dolor y una mejor calidad de vida. Además, tenemos el hecho de que la uña de gato ya ha autorizado su uso por instituciones como la FDA (Food and Drug Administration) como complemento alimenticio.
El conocimiento de la endometriosis sobre fisiopatología con cambios inflamatorios, apoptóticos , inmunomodulador y antioxidante, dio base al uso de fármacos, experimentalmente, que poseen mecanismos de acción con efectos adversos de estos cambios mencionados anteriormente. Un estudio experimental utilizando este extracto mostró una reducción significativa del foco endometrial9.
Una vez establecido que el La uña de gato reduce la endometriosis de manera experimental, es necesario evaluar el mecanismo de acción de Uncaria tomentosa para el tratamiento de esta patología. Entre los fármacos comúnmente utilizados para tratar la endometriosis se encuentran los anticonceptivos, con acción conocida contra la endometriosis. En la evaluación se utilizó un cultivo in vitro del tejido tumoral mamario (carcinoma ductal infiltrante, estadio II y poco diferenciado) y se comparó con Uncaria tomentosa con metotrexato, donde se observó disminución de área específica de receptores de estrógenos provocada por este medicamento a base de hierbas, lo que atribuye una acción anticonceptiva para Uncaria tomentosa 15. Con base en esta premisa se ha hecho necesario evaluar el efecto anticonceptivo de la uña de gato.
El parámetro histológico elegido para evaluar los efectos anticonceptivos se realizó en base a un estudio que examinó el uso de medroxiprogesterona intramuscular en ratas con diferentes dosis, seguido del análisis histológico de los ovarios y la capa epitelial del útero de la muestra12. Se organizaron en tres grupos, controles experimentales, positivos y negativos. 32 mg / día de extracto de Uncaria tomentosa y el grupo de control negativo (grupo Placebo) usaron 1 ml de solución salina al 0,9% a base de Neto e t al.9, que mostró una reducción significativa de la endometriosis sin complicaciones clínicas aparentes. El grupo control positivo (grupo leuprolida) recibió acetato de leuprolida 1 mg / kg de peso corporal aplicada en dosis única subcutánea, según Oktem et al.11, que evaluó el uso de dosis altas de atorvastatina en endometriosis experimental con resultados satisfactorios11. El acetato de leuprolida es un análogo de la GnRH, que tiene excelentes resultados en mujeres con endometriosis, pero tiene un uso limitado debido a sus efectos secundarios, caracterizados principalmente por pérdida ósea y molestias climatéricas14.
El análisis histológico de los ovarios mostró cambios similares en los grupos de uncaria y leuprolida, mostrando una ausencia de atrofia del cuerpo lúteo y folículos ováricos primarios, en la mayoría de las muestras, lo que sugiere la ausencia de actividad ovárica. En la evaluación histológica de la capa epitelial uterina, los grupos Uncaria y leuprolide nuevamente se comportaron de manera similar, con sus muestras mostrando capas epiteliales proliferativas débilmente, contrario a lo observado en el grupo placebo con todas sus muestras en la fase proliferativa. Estos datos según Mukherji y Bhowmik12 son compatibles con la anticoncepción.
Conclusión
Considerando los hallazgos histopatológicos en ratas con endometriosis experimental expuestas al extracto de Uncaria tomentosa y comparadas con control positivo y negativo grupos, sugerimos que los cambios encontrados sean compatibles con la anticoncepción.
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Conflicto de intereses: ninguno
Fuente financiera: ninguno