Introducción
La transformación es el proceso de introducir ADN extraño (por ejemplo, plásmidos, BAC) en una bacteria. Las células bacterianas en las que se puede transformar ADN extraño se denominan competentes. Algunas bacterias son naturalmente competentes (por ejemplo, B. subtilis), mientras que otras, como E. coli, no son naturalmente competentes. Las células no competentes pueden volverse competentes y luego transformarse mediante uno de dos enfoques principales; transformación química y electroporación.
Existen ventajas y desventajas en ambos métodos de transformación. En general, la transformación química es menos propensa a errores y más rápida, sin embargo, la electroporación produce una mayor eficiencia de transformación (fracción de células transformadas que realmente captan el ADN extraño). Consulte Clonación para una discusión más completa de ambos enfoques.
Protocolos
OpenWetWare ya tiene una serie de protocolos relacionados con la transformación bacteriana, pero siempre se aceptan más.
Si Si usa una variante de uno de estos protocolos, no dude en agregar un enlace a su protocolo desde una de estas páginas para que otros usuarios puedan encontrar un protocolo que funcione para ellos. Además, si alguien usa los protocolos de alta eficiencia de Innoe o Hanahan, agregue los protocolos aquí.
Transformación química
Si planea realizar una transformación química, debería ver estos páginas –
- Preparar células químicamente competentes
- Preparar tampón TSS
- Transformar células químicamente competentes
- Preparar células químicamente competentes (Inoue )
- Transformación de células químicamente competentes (Inoue)
- TOP10 células químicamente competentes
Comparación del tampón de transformación química
Alguien debería echa un vistazo a las afirmaciones de Nishimura90. tk 08:58, 25 de septiembre de 2007 (EDT)
Protocolo de transformación de cloruro de rubidio aquí
Alguien debería verificar las afirmaciones de competencia química 1e10 utilizando protocolos de etanol al 10% y cloruro de calcio aquí.
Electroporación
Si planea usar electroporación, consulte estas páginas:
- Celdas electrocompetentes
- Electroporación
Todos los resúmenes de Medline: PubMed | HubMed