4 – ORIGINAL ARTICLE MODELS, BIOLOGICAL
A fogamzásgátló hatása Uncaria tomentosa (macskakarm) kísérleti endometriózisban szenvedő patkányokban1
Efeito anticoncepcional da Uncaria tomentosa (unha-de-gato) em ratas com endometrióz kísérleti
João Nogueira NetoI; Frederico Lucas Lima Paiva CavalcanteII; Rafael Antonio Freire CarvalhoII; Taciana Gabrielle Pinheiro de Moura RodriguesII; Mariana Santana XavierII; Pablo Gustavo Ribeiro FurtadoIII; Eduardo SchorIV
PhD fokozat, Sao Paulo Szövetségi Egyetem (UNIFESP) és Endometriózis és Sebészeti Laboratórium, HU-UFMA, Maranhao, Brazília. Megtervezte a technikai eljárásokkal foglalkozó protokollt, amely felelős a kéziratok megírásáért, felelős a tanulmány szellemi és tudományos tartalmáért, felügyelte a vizsgálat minden szakaszát, iránymutatásokat adott a műtéti beavatkozáshoz. , Brazília. Részt vesz a technikai eljárásokban, felelős a kéziratok elkészítéséért
IIIMD, Patológiai Osztály, HU-UFMA, Maranhao, Brazília. Makroszkópos és hisztopatológiai vizsgálatok
IVPhD, társprofesszor, UNIFESP, Sao Paulo és a Paulista Orvostudományi Kar (EPM-UNIFESP) medencefájdalom és endometriózis osztályának vezetője, Brazília. Felelős az adatok összegyűjtéséért és értelmezéséért, segítséget nyújt a technikai eljárásokban, útmutatást nyújt a műtéti beavatkozásokhoz. Patkányok méhének és petefészkének hámrétege indukált endometriózisban, Uncaria tomentosa kivonattal kezelve.
MÓDSZEREK: 29 kísérleti endometriosisban szenvedő patkányt szelektáltunk, és három csoportra osztottuk: Az uncaria csoport 32 mg / ml Uncaria tomentosa kivonatot kapott, naponta 1 ml-t, a placebo csoport pedig napi 1 ml 0,9% sóoldatot kapott 14 napon keresztül. napok (mindkét csoport); a leuprolidcsoport 1 mg / testtömeg kg leuprolid-acetátot kapott egyszeri szubkután dózisban. A kezelés 15. napján a méh szarvát és petefészkeit eltávolítottuk hisztopatológiai elemzés céljából.
EREDMÉNYEK: Az uncaria csoport kilenc mintát mutatott be (90%) éretlen petefészek tüszőkkel, míg a placebo csoport egyetlen esetet sem mutatott be, és a leuprolid csoportban nyolc patkány (88%) volt azonos változással. A placebo csoport minden állatban érett sárgatestet mutatott, ritkábban fordult elő uncaria (10%) és leuprolid (22%) csoportokban. A méh hám gyenge proliferációt mutatott az uncaria csoport kilenc (90%) mintájában, két (20%) állatban a placebo csoportban és hét (77,8%) patkányban a leuprolid csoportban.
KÖVETKEZTETÉSEK: Az eredmények arra utalnak, hogy az Uncaria tomentosa fogamzásgátló hatású.
Kulcsszavak: Endometriosis. Fitoterápia. Fogamzásgátlás. Patkányok.
RESUMO
OBJETIVO: Avaliação histológica do útero e parênquima ovariano de ratas com endometriose induzida tratadas com extrato de Uncaria tomentosa.
MÉTODOS: Foram selecionadas 29 ratas com endometriose experimental e formados três groupos: O grupo uncaria recebeu extrato de Uncaria tomentosa com 32mg / ml, administrado 1ml ao dia eo grupo placebo recebeu 1ml de solução salina a 0,9%, ambos por 14 diasz; o grupo leuprolida recebeu acetato de leuprolida 1mg / kg de peso corporal aplicado via subcutânea dose única. No 15 ° dia de tratamento realizou-se retirada de corno uterino e ovários para análise histopatológica.
EREDMÉNYEK: O grupo uncaria apresentou nove amostras (90%) com maturação incompleta dos folículos ovarianos, já o grupo placebo não apresentou nenhum caso e no groupo leuprolida houve oito ratas (88%) comma mesa alteração. O grupo placebo apresentou corpo lúteo maduro em todos os animais, acontecendo de forma menos freqüente nos grupos uncaria (10%) e leuprolida (22%). O epitélio uterino se mostrou fracamente proliferativo em nove (90%) das amostras do grupo unacaria, em dois (20%) casos do grupo placebo e sete (77,8%) casos no groupo leuprolida.
KÖVETKEZTETÉS: Os achados sugerem que a Uncaria tomentosa tem efeito anticoncepcional.
Descritores: Endometriose. Fitoterápia. Anticoncepção. Ratos.
Bevezetés
Az endometriózis olyan betegség jelenléte, amelyet szerkezetileg és funkcionálisan hasonló a méh üregén kívüli endometrium szövetéhez, ami befolyásolja az életminőséget és a reproduktív a betegek kapacitása. Általában a kismedencei szervekben fejlődik ki, például a hashártyában, a petefészkekben, a petevezetékekben, a méhben és a fornix Douglas1,2-ben. Ez a patológia úgy viselkedik, mint egy ösztrogénre reagáló betegség, gyulladásos és immunmoduláló tevékenységekkel, valamint a sejtek apoptózisának és az oxidatív stressz egyensúlyhiányának2-5.
Az endometriózis kezelése lehet műtéti vagy klinikai, amelynek szokásos gyógyszeres terápiája olyan, amely beavatkozik a normális menstruációs ciklusba, ál-terhességet, ál-menopauzát vagy krónikus anovulációt kiváltva, klinikai javulást biztosítva. Hatásai azonban nem gyógyító jellegűek, gyakran ismétlődnek, ami indokolja az új kezelések keresését6.
Az Uncaria tomentosa, közismert nevén macskakarom, a Rubiaceae családhoz tartozik, amely általában a Dél- és Közép-Amerika. Ezt a növényt kivonat formájában az őslakosok széles körben használják, és gyakran használják különféle betegségek alternatív gyógymódjaként. Tanulmányok kimutatták, hogy a macska karma gyulladáscsökkentő, immunmoduláló, apoptotikus hatású antioxidáns, valamint fogamzásgátló hatás az endometriózis kezelésének lehetséges alternatívájának igazolására7,8.
A tanulmány célja a méh parenchyma hámrétegének szövettani változásainak értékelése volt. indukált endometriózisban szenvedő patkányok petefészke, Uncaria tomentosa vizes kivonattal (macskakarm) kezelve.
Módszerek
Ez a kísérleti vizsgálat 2011 április és május között fejeződött be, 40 Wistar patkány (Rattus norvegicus albinos) felnőtt, nőstény, szűz, súlya 180 és 250 gramm között, 60 napos korban, a Maranhãói Szövetségi Egyetem (UFMA) Bioteriumja nyújtotta.
Ezt a kutatást az Egyetemi Kórház Kísérleti Sebészeti Laboratóriumában végezték. Maranhão Szövetségi Egyetem. Követte a kísérleti állatok felhasználására vonatkozó brazil jogszabályokat (Arouca-törvény, 11,794 / 2008) és a Nemzetközi Laboratóriumi Állattudományi Tanácshoz tartozó intézmény, a Brazil Állatkísérleti Főiskola (COBEA) által meghatározott normákat. A vizsgálatot az Állatok Kísérleti Etikai Bizottsága (CEEA-UEMA) jóváhagyta a 011/2011 protokollszámmal.
Az állatokat polipropilén ketrecenként öt csoportba sorolták, rozsdamentes acél rács borítással, 46 cm x 31 cm x 16 cm, fenekével borított faforgács, 48 óránként cserélve. Az állatokat állandó környezeti körülmények között tartottuk, patkánytojást (Purina®, São Paulo, Brazília) és ad libitum vizet adva adaptációhoz hét napig zajszabályozással, hőmérséklet 22 ° C ± 2 ° C, relatív páratartalom 40% 60%, 12/12 órás fény / sötét ciklus.
Az endometriózis indukcióját a Nogueira Neto és munkatársai által javasolt módszertan szerint hajtották végre9. Az első műtét óta eltelt 21 nap elteltével a patkányokat ismét műtéten esték át, ekkor elvégezték a hashártya-leltár felmérését, az autotranszplantációs fókusz digitális pachiméterrel történő azonosításával és mérésével, majd a térfogat kiszámításával a Növekedési implantátumok a Quereda et al. 10 szerint. Csak azok maradtak a vizsgálatban, amelyeknél a növekedés szintje kettő és három volt.
A patkányokat véletlenszerűen három csoportba osztották. Mindegyik állatot négy mm-es állandó kefével (Pilot®, São Paulo, Brazília) jelöltük meg a farokon, és azonosítottuk a ketreceket. A szondázás kezdete az endometriózis indukciójának műtét utáni 22. napjától kezdődött.
A csoportokat a következőképpen osztottuk fel: az Uncaria csoport 32 mg / ml Uncaria tomentosa kivonattal (Macska karma 100 mg, Herbarium of Brazília), napi 1 ml-t adva, és a placebo csoport napi szondát kapott 1 ml 0,9% -os fiziológiás sóoldattal, mindkettőt 14 napig, Nogueira Neto és mtsai. 9 szerint. 75 mg, ABBOTT of Brazil) egyszeri szubkután dózis 11.
A kísérleti gyógyszer 16 g macska karmos kivonatból (Uncaria tomentosa) és 500 ml 0,9% sóoldatból áll. A feldolgozást 160 tabletta 100 mg macska karom kivonat (Cat’s Claw 100 mg, Herbarium of Brazil) őrlésével porcelánhabarcsban őrölték meg, majd 500 ml 0,9% -os NaCl-ban oldották fel. főzőpohárban simára keverjük. A keveréket átlagosan 15 perc alatt készítették el, és a teljes térfogat 500 ml volt 32 mg / ml koncentrációjú szuszpenzióban9.
A kezelés befejezése után új műtétet hajtottak végre, és ekkor , ismét elvégezték a peritoneális üreg leltározását. A fennmaradó jobb méhszarvat és mindkét petefészket eltávolítottuk szövettani értékelés céljából. Az eltávolított részeket 0,9% -os fiziológiás sóoldattal megtisztítottuk, és 10% pufferelt formalint tartalmazó tartályban tároltuk, azonosítást kaptunk és továbbítottuk a Maranhãói Szövetségi Egyetem Egyetemi Kórházának Patológiai Osztályára. A szövetrészeket elkészítettük és hematoxilin-eozinnal (HE) festettük.
Az egyes csoportokba tartozó állatokat a kezelés megkezdése utáni 15. napon leöltük. Tömegük után 150 mg / kg nátrium-tiopentált (Thiopental®, Crystal, St. Paul) kaptak intraperitoneális beadás útján.A gyógyszert azonos térfogatú sóoldattal hígították a Szövetségi Állategészségügyi Tanács (CFMV) 714 számú, 2002. június 20-i állásfoglalása szerint. A halált kardio-légzési leállás és a reflexek teljes hiánya jellemezte.
Az adatelemzés leíró jellegű volt, Mukherji és Bhowmik12 szövettani eredményei alapján.
Eredmények
A 40 patkány kezdeti mintájából tízet kizártunk, mert nem alakult ki a második és a harmadik fokú endometriózis, egyet pedig a szoptatás során történt aspiráció miatt. A végső mintát 29 patkányból állítottuk össze, három csoportra osztva: uncaria és placebo, mindkettő tíz állattal; és leuprolid csoport kilenc patkánnyal.
Az Uncaria tomentosa-val (Uncaria csoport) kezelt csoport kilenc esetben (90%) éretlen tüszőket mutatott ki (1. táblázat és 1. ábra), a teljes érésű és érett tüszőket pedig sárgatest (2. táblázat) egy esetben van jelen (10%).
A méh szövettana (3. táblázat) kilenc mintában (90) gyengén proliferatív endometriumot mutatott (2. ábra). %).
A placebo csoportban minden esetben teljes érésű és érett sárgatestű tüszők voltak (100%). Az endometrium vonatkozásában nyolc esetben volt proliferatív (80%).
A leuprolid csoportban minden mintában éretlen tüszők voltak, nyolc mintában pedig atrophiált corpus luteum (88%). Az endometrium két esetben atrofált (3. ábra) (22,2%), hét esetben gyengén proliferatív (77,8%).
Megbeszélés
Klinikai és kísérleti adatokkal végzett vizsgálatok a gyógynövények endometriózis kezelésére történő felhasználásáról azt jelentették, hogy számos gyulladáscsökkentő, fájdalomcsillapító, immunmoduláló és antioxidáns tulajdonságú gyógyszer hatékonyan küzd a betegség ellen. Új klinikai vizsgálatokra van szükség a gyógynövények hatékonyságáról a nők endometriózisának kezelésében13. Ebben az értelemben az Európai Emberi Reprodukciós és Embriológiai Társaság által az endometriózis diagnosztizálásához és kezeléséhez szükséges bizonyíték útmutató a D fokozatú ajánlási fokozatot veszi figyelembe a gyógynövények endometriózis kezelésében történő alkalmazására, vagyis nincs bizonyíték hogy támogassa ezeket a kezeléseket, de ez a társadalom azt javasolja, hogy a növényi gyógyszereket ne dobják el, mert néhány nőnél, aki ezt a gyógynövényt használta, észrevették a fájdalom csökkenését és az életminőség javulását. Ezenkívül megvan az a tény, hogy a macskakarm már engedélyezte az olyan intézmények használatát, mint az FDA (Food and Drug Administration).
Az endometriózis ismeretei a gyulladásos változásokkal járó fiziopatológiáról, apoptotikusak , immunmoduláló és antioxidáns, alapot adott olyan gyógyszerek kísérleti használatához, amelyek hatásmechanizmusokkal rendelkeznek, és ezeknek a fent említett változásoknak káros hatásai vannak. Egy kísérlet, amely ezt a kivonatot használta, az endometrium fókuszának jelentős csökkenését mutatta9. a macska karma kísérletileg csökkenti az endometriózist, ennek a patológiának a kezeléséhez értékelni kell az Uncaria tomentosa hatásmechanizmusát. Az endometriózis kezelésére általánosan alkalmazott gyógyszerek közé tartoznak a fogamzásgátlók, amelyeknek ismert hatása van az endometriózis ellen. Az emlődaganatszövet (infiltráló ductalis carcinoma, II. Stádiumú és rosszul differenciált) in vitro tenyészetének értékelésében az Uncaria tomentosa-t alkalmazták és összehasonlították a metotrexáttal, ahol megfigyelték, hogy a növényi gyógyszer okozta ösztrogénreceptorok specifikus területe csökken. fogamzásgátló hatás az Uncaria tomentosa ellen 15. Ez az előfeltevés alapján szükségessé vált a macska karmának fogamzásgátló hatásának értékelése.
A fogamzásgátló hatások értékelésére választott szövettani paramétert egy tanulmány alapján készítették, amely megvizsgálta intramuszkuláris medroxi-progeszteron alkalmazása különböző dózisú patkányokban, majd a petefészkek és a méh hámrétegének szövettani elemzése12. Ezeket három csoportba soroltuk, kísérleti, pozitív és negatív kontrollokat. A kísérleti csoport (Uncaria csoport) felhasználta 32 mg / nap Uncaria tomentosa kivonat és a negatív kontrollcsoport (Placebo csoport) napi 1 ml 0,9% sóoldatot használt a Neto e alapján t al.9, amely az endometriózis szignifikáns csökkenését mutatta, klinikai szövődmények nélkül. A pozitív kontrollcsoport (leuprolidcsoport) 1 mg / testtömeg-kg leuprolid-acetátot kapott egyszeri szubkután dózisban, az Oktem és mtsai. 11 alapján, amely kielégítő eredménnyel értékelte az atorvastatin nagy dózisának alkalmazását kísérleti endometriózisban11. A leuprolid-acetát egy GnRH-analóg, amelynek kiváló eredményei vannak az endometriózisban szenvedő nőknél, de a mellékhatások miatt korlátozottan használják, főként csontvesztés és klimaxos panaszok jellemzik14.
A petefészkek szövettani elemzése hasonló változásokat mutatott az uncaria és a leuprolid csoportokban, és a legtöbb mintában a corpus luteum és az elsődleges petefészek tüszők atrófiájának hiányát mutatta, ami a petefészek aktivitásának hiányára utal. A méh hámrétegének szövettani kiértékelésében az Uncaria és a leuprolid csoportok ismét hasonlóan teljesítettek, mintáik gyengén proliferatív hámrétegeket mutattak, ellentétben azzal, amelyet a placebo csoportban tapasztaltak, az összes mintájukkal a proliferációs fázisban. Ezek az adatok Mukherji és Bhowmik12 szerint kompatibilisek a fogamzásgátlással. javasoljuk, hogy a talált változások kompatibilisek legyenek a fogamzásgátlással.
1. Sampson J. Peritonealis endometriosis az endometrium szövetének a peritonealis üregbe történő menstruációs disszeminációja miatt. Am J Obstet Gynecol. 1927; 14: 442-69.
2. Banu SK, Starzinski-Powitz A, Speights VO, Burghardt RC, Arosh JA. Peritonealis endometriosis kiváltása meztelen egerekben emberi immortalizált endometriosis epitheliális és stromális sejtek alkalmazásával: potenciális kísérleti eszköz az endometriosis molekuláris patogenezisének tanulmányozására emberben. Fertil Steril. 2009; 91: 2199-209.
4. Braun PD, Ding J, Shen J, Rana N, Fernandez BB, Dmowski WP. Az apoptózis és az eutópiás méhnyálkahártyában lévő makrofágok száma közötti kapcsolat endometriózisban és anélkül szenvedő nőknél. Fertil Steril. 2002; 78: 830-5.
6. Olive DL, Pritts AE. Az endometriózis kezelése. N Engl J Med. 2001; 345: 266-75.
8. Kuras M, Nowakowska J, Sliwinska E, Pilarski R, Ilasz R, Tykarska T, Zobel A, Gulewicz K. Az Uncaria tomentosa (Wild ) DC. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 211-21.
9. Nogueira Neto J, Coelho TM, Aguiar GC, Carvalho LR, Araújo AG, Girão MJ, Schor E. Kísérleti endometriózis csökkentés Uncaria tomentosa (macska karom) kivonattal kezelt patkányokban. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011; 154: 205-8.
10. Quereda F, Barroso J, Acien P. A triptoreline és a gestrinone egyéni és kombinált hatása patkányok kísérleti endometriózisára. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 1996; 67: 35-40 .
12. Bhowmik T, Mukherjea M. A patkány petefészkében és méhében bekövetkező szövettani változások injekciós fogamzásgátló terápia után. Fogamzásgátlás. 1988; 37: 529-38.
15. Salazar E, Jayme V. Az ösztrogénreceptor specifikus kötőhelyeinek kimerülése az Uncaria tomentosa által. Proc Western Pharmacol Soc. 1998; 41: 123-4.
Érdekkonfliktus: nincs
Pénzügyi forrás: nincs