Geplaatst op 15 juli 2012 door Kelly Gleason in Lab Skills, Research
Translationeel onderzoek vindt zijn tot in alle fasen van klinische proeven, wat betekent dat steeds meer onderzoeksverpleegkundigen de taak hebben om monsters te verzamelen en te verwerken. Deze monsters zijn zeer waardevolle bronnen en cruciaal voor het algehele succes van onderzoek.
Dit vereist dat veel onderzoeksverpleegkundigen leren en kennis en vaardigheden ontwikkelen in het laboratorium, niet alleen om veilig in een laboratoriumomgeving te werken, maar ook om integriteit van de verwerkte monsters. Het kan een uitdaging en overweldigend zijn om voor het eerst instructies en laboratoriumhandleidingen te lezen om ons te begeleiden bij het verwerken van monsters. Als je geluk hebt, geeft het labhandboek je de snelheid waarmee je monsters moeten worden gedraaid in dezelfde taal die door je centrifuge wordt gesproken, ofwel RPM’s of G-kracht. Maar wat doe je als dat niet het geval is? Het antwoord is eenvoudiger dan je denkt …
De kracht die wordt uitgeoefend op een deeltje in een centrifuge is een eenvoudige functie van de rotatiesnelheid van de centrifuge en de rotatiestraal. De feitelijke vergelijking is:
RCF of G-kracht = 1.12 x R x (RPM / 1000) ²
R is de rotatiestraal gemeten in millimeters. Op de onderstaande foto is R bijvoorbeeld 240 mm.
R kan aan de bovenkant van de buis worden gemeten (Rmin), het midden van de buis (Rav) of de onderkant van de buis (Rmax). Als uw protocol niet specificeert, kunt u koos gebruiken, maar als u iets probeert te pelleteren, moet u waarschijnlijk Rmax gebruiken aangezien de pellets zich onderin de buis vormen.
Sedimentatie
Deeltjes in een suspensie zullen na verloop van tijd bezinken op de bodem van een vat, dit wordt sedimentatie genoemd. De deeltjes vallen door de zwaartekracht naar de bodem, net zoals kruiden in een saladedressing zich op de bodem van de fles nestelen. Deze kracht wordt uitgedrukt als G. Centrifugeren verhoogt de sedimentatiesnelheid (dwz ophoping van rode en witte bloedcellen in de bodem van een bloedbuis) door de bloedmonsters rond te draaien en een middelpuntvliedende kracht te creëren die op de deeltjes werkt (in dit geval rode en witte bloedcellen).
RPM staat voor ‘omwentelingen per minuut’. Dit is hoe fabrikanten van centrifuges in het algemeen beschrijven hoe snel de centrifuge gaat (d.w.z. ronddraait). De rotor, ongeacht zijn grootte, draait met die snelheid. De kracht die op de inhoud wordt uitgeoefend, varieert echter afhankelijk van de grootte van de centrifuge, aangezien een grotere centrifuge een grotere straal heeft en een kleinere centrifuge een kortere straal.
Bijvoorbeeld bij het draaien op 2000 RPM, een grotere centrifuge met een langere radiuslengte zal monsters draaien met een hogere g-kracht dan een kleinere centrifuge met een kortere radiuslengte.
Als je weet met welke g-kracht je je monsters moet draaien en je kunt de straal op je centrifuge meten, je kunt de snelheid of het toerental bepalen dat je nodig hebt om je centrifuge in te stellen met een Nomograph, zoals hieronder uiteengezet.
Je kunt deze vergelijking ook gebruiken als je geen toegang hebt tot een nomograaf .:
G-force = 0.000001118 x R x RPM²
Wanneer je kent de G-kracht waarmee een monster moet worden gedraaid, je kunt de straal van je centrifuge meten en het aantal omwentelingen per minuut bepalen waarop je centrifuge moet worden ingesteld.
De boodschap die naar huis moet worden gebracht is dat centrifugatiesnelhedenvermeld in RPM is alleen constant voor centrifuges met dezelfde rotorradii. Als je een RPM-instelling gebruikt uit een protocol waarbij iemand een centrifuge gebruikte met een andere straal dan de jouwe, krijg je een andere G-kracht. Vaak is het verschil niet significant genoeg om het monster te beïnvloeden, maar het is altijd een goede gewoonte om zoveel mogelijk te standaardiseren hoe monsters worden verwerkt bij verschillende instellingen met verschillende apparatuur.
Monsterverzameling en -verwerking zijn zeer belangrijke aspecten van klinisch onderzoek en de vaardigheden van de onderzoeksverpleegkundige in het laboratorium zijn niet alleen cruciaal voor het handhaven van een veilige praktijk, maar ook voor het waarborgen van de integriteit van het monster. Resultaten van onderzoeken zijn afhankelijk van de kwaliteit van de verzameling en verwerking van deze monsters en goede laboratoriumvaardigheden helpen onderzoeksverpleegkundigen dit te bereiken.
Als u meer wilt weten, kunt u bij ons terecht voor Lab Skills for Clinical Research Personeel