4 – MODELE ARTICOLULUI ORIGINAL, BIOLOGICE
Efectul contraceptiv al Uncaria tomentosa (cat „s claw) in rats with experimental endometriosis1
Efeito anticoncepcional da Uncaria tomentosa (unha-de-gato) em ratas com endometriose experimental
João Nogueira NetoI; Frederico Lucas Lima Paiva CavalcanteII; Rafael Antonio Freire CarvalhoII; Taciana Gabrielle Pinheiro de Moura RodriguesII; Mariana Santana XavierII; Pablo Gustavo Ribeiro FurtadoIII; Eduardo SchorIV
Diplomă de doctorat, Universitatea Federală din Sao Paulo (UNIFESP) și Unitatea de endometrioză și laborator chirurgical, HU-UFMA, Maranhao, Brazilia. Proiectarea protocolului, implicată în procedurile tehnice, responsabilă pentru scrierea manuscriselor, responsabilă pentru conținutul intelectual și științific al studiului, a supravegheat toate fazele studiului, a oferit îndrumări pentru intervenția chirurgicală
II Studenți universitari, Universitatea Federală din Maranhao (UFMA) , Brazilia. Implicat cu proceduri tehnice, responsabil pentru pregătirea manuscriselor
IIIMD, Departamentul de Patologie, HU-UFMA, Maranhao, Brazilia. Examinări macroscopice și histopatologice
IVPhD, profesor afiliat, UNIFESP, Sao Paulo și șef al unității de durere pelvină și endometrioză a Școlii de Medicină Paulista (EPM-UNIFESP), Brazilia. Responsabil pentru achiziționarea și interpretarea datelor, ajutat cu procedurile tehnice, oferă îndrumări pentru intervențiile chirurgicale
Corespondență
REZUMAT
SCOP: Evaluarea modificărilor histologice în parenchim Stratul epitelial al uterului și ovarului șobolanilor cu endometrioză indusă, tratat cu extract de Uncaria tomentosa.
METODE: 29 de șobolani cu endometrioză experimentală au fost selectați și împărțiți în trei grupuri: grupul uncaria a primit 32 mg / ml extract de Uncaria tomentosa, 1 ml administrat zilnic, iar grupul placebo a primit 1 ml soluție salină 0,9% pe zi, timp de 14 zile (ambele grupuri); grupul leuprolidic a primit acetat de leuprolidă 1 mg / kg greutate corporală aplicat o singură doză subcutanată. În a 15-a zi de tratament, cornul și ovarele uterine au fost îndepărtate pentru analiză histopatologică.
REZULTATE: Grupul uncaria a prezentat nouă eșantioane (90%) cu foliculi ovarieni imaturi, în timp ce grupul placebo nu a prezentat niciun caz, iar în grupul leuprolid au existat opt șobolani (88%) cu aceeași modificare. Grupul placebo a prezentat corp luteu matur la toate animalele, apărând mai puțin frecvent la grupurile uncaria (10%) și leuprolidă (22%). Epiteliul uterin a arătat o proliferare slabă în nouă (90%) probe din grupul uncaria, la două (20%) animale din grupul placebo și șapte (77,8%) șobolani din grupul leuprolide.
CONCLUZII: Constatările sugerează că Uncaria tomentosa are efect contraceptiv.
Cuvinte cheie: Endometrioză. Fitoterapie. Contracepție. Rats.
RESUMO
OBJETIVO: Avaliação histológica do útero e parênquima ovariano de ratas com endometriose induzida tratadas com extrato de Uncaria tomentosa.
MÉTODOS: Foram selected 29 ratas com endometriose experimental and formados três groups: O grup uncaria recebeu extrat de Uncaria tomentosa com 32mg / ml, administrat 1ml ao dia eo grup placebo recebeu 1ml de soluție salină la 0,9%, ambii 14 dias; o grupo leuprolida recebeu acetato de leuprolida 1mg / kg de peso corporal aplicat via subcutânea dose unique. No 15 ° dia de tratamento realizou-se retirada de corno uterino e ovários para analise histopatológica.
RESULTADOS: O grup uncaria apresentou nove amostras (90%) com maturação incompleta dos folicles ovarianos, já o group placebo não apresentou nenhum case e no group leuprolida houve oito ratas (88%) com a same alteração. O grupo placebo apresentou corpo lúteo maduro em all os animais, acontecendo de forma less freqüente nos grupos uncaria (10%) e leuprolida (22%). O epitelio uterino se arată fracamente proliferativo em nove (90%) das amostras do group unacaria, em dois (20%) cases do group placebo e sete (77.8%) cases no group leuprolida.
CONCLUZIE: Os achados sugerem que a Uncaria tomentosa tem efeito anticoncepcional.
Descriptori: Endometriose. Fitoterapia. Anticoncepção. Ratos.
Introducere
Endometrioza este o boală caracterizată prin prezența unui țesut similar din punct de vedere structural și funcțional cu țesutul endometrial din afara cavității uterine, care afectează calitatea vieții și reproducerea capacitatea pacienților. De obicei, se dezvoltă în organele pelvine, cum ar fi peritoneul, ovarele, trompele uterine, uterul și fornixul Douglas1,2.
Incidența endometriozei este la fel de mare ca aproximativ 10% dintre femeile în vârstă de reproducere. Această patologie se comportă ca o boală receptivă la estrogeni cu activități inflamatorii și imunomodulatoare, precum și un dezechilibru al apoptozei celulare și al stresului oxidativ2-5.
Tratamentul endometriozei poate fi chirurgical sau clinic, a cărui terapie medicamentoasă obișnuită este una care interferează asupra ciclului menstrual normal inducând pseudosarcină, pseudomenopauză sau anovulație cronică, oferind îmbunătățiri clinice. Cu toate acestea, efectele sale nu sunt curative, cu recurențe frecvente, care justifică căutarea de noi tratamente6.
Uncaria tomentosa, cunoscută popular sub numele de gheara pisicii, aparține familiei Rubiaceae, frecvent întâlnită în zonele tropicale America de Sud și Centrală. Această plantă, sub formă de extract, este utilizată pe scară largă de către indigeni și este adesea utilizată ca tratament alternativ pentru diferite boli. Studiile au arătat că gheara pisicii are antiinflamatoare, imunomodulatoare, pro-apoptotice. și anti-oxidant, precum și efect contraceptiv, pentru a justifica o posibilă alternativă pentru tratarea endometriozei7,8.
Scopul acestui studiu a fost evaluarea modificărilor histologice în stratul epitelial al parenchimului uterin și ovarian de șobolani cu endometrioză indusă, tratat cu extract apos Uncaria tomentosa (gheara pisicii).
Metode
Acest studiu experimental a fost finalizat în perioada aprilie-mai 2011, cu un eșantion de 40 de șobolani Wistar (Rattus norvegicus albinos) adulți, femele, virgin, cu o greutate cuprinsă între 180 și 250 de grame, cu vârsta de 60 de zile, furnizat de Bioterium al Universității Federale din Maranhão (UFMA).
Această cercetare a fost efectuată la Laboratorul de Chirurgie Experimentală al Spitalului Universitar din Universitatea Federală din Maranhão. A urmat legislația braziliană pentru utilizarea animalelor experimentale (Legea Arouca nr. 11.794 / 2008) și standardele stabilite de Colegiul brazilian de experimentare animală (COBEA), o instituție afiliată Consiliului internațional pentru știința animalelor de laborator. Studiul a fost aprobat de Comitetul de etică pentru experimentarea animalelor (CEEA-UEMA) sub numărul de protocol 011/2011.
Animalele au fost grupate câte cinci pe cușcă din polipropilenă cu capac pentru grătar din oțel inoxidabil, cu dimensiuni de 46 cm x 31 cm x 16 cm cu fundul acoperit cu așchii de lemn, schimbat la fiecare 48 de ore. Animalele au fost ținute în condiții de mediu constante, primind șobolan (Purina®, São Paulo, Brazilia) și apă ad libitum șapte zile pentru adaptare, cu control al zgomotului, temperatură 22 ° C ± 2 ° C, umiditate relativă 40% 60%, 12/12 ore ciclu lumină / întuneric.
Inducerea endometriozei a fost efectuată conform metodologiei propuse de Nogueira Neto și colab.9. După 21 de zile de la prima intervenție chirurgicală, șobolanii au fost supuși din nou intervenției chirurgicale, moment în care s-a făcut inventarul cavității peritoneale cu identificarea și măsurarea focalizării autotransplantului cu un pașimetru digital, urmat de calcularea volumului utilizând sistemul de clasificare a gradului de Implanturi de creștere în conformitate cu Quereda și colab. Doar cei care au dezvoltat un nivel de creștere doi și trei au rămas în studiu.
Șobolanii au fost împărțiți în mod aleatoriu în trei grupuri. Fiecare animal a fost marcat pe coadă cu o perie permanentă de patru mm (Pilot®, São Paulo, Brazilia) și au fost identificate cuștile. Începutul gavajului a fost din 22 zile post-chirurgicale de inducție a endometriozei.
Grupurile au fost împărțite după cum urmează: grupul Uncaria a primit gavaj cu 32 mg / ml extract Uncaria tomentosa (Cat’s s Claw 100mg, Herbarium of Brazilia), a administrat 1 ml pe zi, iar grupul placebo a primit gavaj zilnic cu 1 ml de soluție salină 0,9%, ambele timp de 14 zile, în conformitate cu Nogueira Neto și colab.9. 75 mg, ABBOTT din Brazilia) doză unică subcutanată11.
Medicamentul experimental este compus din 16 g de extract de gheară de pisică (Uncaria tomentosa) și 500 ml de soluție salină 0,9%. Prelucrarea a fost făcută prin măcinarea a 160 de comprimate de 100 mg de extract de gheară de pisică (Cat’s Claw 100 mg, Herbarium of Brazil) într-un mortar de porțelan cu pistil, și apoi procedarea la dizolvarea acestuia în 500 ml NaCl 0,9% într-un pahar de amestecat până se omogenizează. Amestecul a fost făcut într-un timp mediu de 15 minute, iar volumul total a fost de 500 ml în suspensie cu o concentrație de 32 mg / ml9.
După terminarea tratamentului, s-a făcut o nouă intervenție chirurgicală și, în acest moment, , s-a făcut din nou inventarul cavității peritoneale. Cornul uterin drept rămas și ambele ovare au fost îndepărtate pentru evaluare histologică. Părțile îndepărtate au fost curățate cu soluție salină 0,9% și depozitate într-un recipient cu 10% formalină tamponată, primind identificare și trimise către Departamentul de Patologie al Spitalului Universitar al Universității Federale din Maranhão. Secțiunile de țesut au fost făcute și colorate cu hematoxilin-eozină (HE). Animalele din fiecare grup au fost ucise în a 15-a zi după începerea tratamentului. După greutate, li s-au administrat 150 mg / kg de tiopental sodic (Thiopental®, Crystal, St. Paul) prin administrare intraperitoneală.Medicamentul a fost diluat în volum egal de soluție salină, conform rezoluției nr. 714, 20 iunie 2002, Consiliul Federal de Medicină Veterinară (CFMV). Moartea a fost caracterizată prin stop cardio-respirator și absența completă a reflexelor.
Analiza datelor a fost descriptivă, pe baza constatărilor histologice în conformitate cu Mukherji și Bhowmik12.
Rezultate
Din eșantionul inițial de 40 de șobolani, zece au fost excluși pentru a nu dezvolta endometrioză de gradele doi și trei, și unul din cauza aspirației în timpul gavajului. Eșantionul final a fost compus pentru 29 de șobolani, fiind împărțit în trei grupe: uncaria și placebo, ambele cu zece animale; și grupul leuprolidic cu nouă șobolani.
Grupul supus tratamentului cu Uncaria tomentosa (grupul Uncaria) a dezvăluit foliculi imaturi (Tabelul 1 și Figura 1) în nouă cazuri (90%), iar foliculii cu maturare completă și maturi corpul galben (Tabelul 2) este prezent într-un caz (10%).
Istologia uterină (Tabelul 3) a arătat endometru slab proliferativ (Figura 2) în nouă probe (90 %).
Placebo grupul a avut foliculi cu maturare completă și corp luteu matur în toate cazurile (100%). În raport cu endometrul, acesta a fost proliferativ în opt cazuri (80%).
Grupul leuprolidic a avut foliculi imaturi în toate probele și corpul galben atrofiat în opt probe (88%). Endometrul a fost atrofiat (Figura 3) în două cazuri (22,2%) și slab proliferativ în șapte cazuri (77,8%).
Discuție
Studiile cu date clinice și experimentale despre utilizarea plantelor medicinale pentru tratarea endometriozei au raportat că mai multe medicamente cu proprietăți antiinflamatorii, analgezice, imunomodulatoare și antioxidante sunt eficiente în combaterea acestei boli. Noi studii clinice despre eficacitatea ierburilor sunt necesare pentru tratamentul endometriozei la femei13. În acest sens, ghidul de evidență pentru diagnosticul și tratamentul endometriozei efectuat de Societatea Europeană de Reproducere Umană și Embriologie, ia în considerare un grad de recomandare de gradul D pentru utilizarea ierburilor medicinale în tratamentul endometriozei, adică nu există dovezi pentru a susține aceste tratamente, dar această societate recomandă ca medicamentele pe bază de plante să nu fie aruncate, deoarece la unele femei care au folosit această plantă s-a observat o scădere a durerii și o calitate a vieții îmbunătățită. În plus, avem faptul că gheara pisicii a autorizat deja utilizarea acesteia de către instituții precum FDA (Food and Drug Administration) ca supliment alimentar.
Cunoașterea endometriozei despre fiziopatologie cu modificări inflamatorii, apoptotice , imunomodulator și antioxidant, au dat bazele utilizării experimentale a unor medicamente care posedă mecanisme de acțiune cu efecte adverse ale acestor modificări menționate mai sus. Un studiu experimental care a folosit acest extract a arătat o reducere semnificativă a focalizării endometriale9.
gheara pisicii reduce endometrioza experimental, este necesar să se evalueze mecanismul de acțiune Uncaria tomentosa pentru tratamentul acestei patologii. Printre medicamentele utilizate în mod obișnuit pentru tratarea endometriozei se numără contraceptivele, cu acțiune cunoscută împotriva endometriozei. În evaluarea culturii in vitro a țesutului tumoral mamar (carcinomul ductal infiltrat, stadiul II și slab diferențiat) a fost utilizată Uncaria tomentosa și comparată cu metotrexatul, unde s-a observat scăderea zonei specifice a receptorilor de estrogen cauzată de acest medicament pe bază de plante, o acțiune contraceptivă împotriva Uncaria tomentosa 15. Pe baza acestei premise a devenit necesară evaluarea efectului contraceptiv al ghearei pisicii.
Parametrul histologic ales pentru evaluarea efectelor contraceptive a fost realizat pe baza unui studiu care a examinat utilizarea medroxi-progesteronului intramuscular la șobolani cu doze diferite, urmată de analiza histologică a ovarelor și a stratului epitelial al uterului din eșantion12. Au fost organizate în trei grupuri, martori experimentali, pozitivi și negativi. 32 mg / zi de extract de Uncaria tomentosa și grupul de control negativ (grupul placebo) au utilizat zilnic 1 ml de soluție salină 0,9% pe baza Neto e t al.9, care a arătat o reducere semnificativă a endometriozei fără complicații clinice evidente. Grupul de control pozitiv (grupul leuprolidic) a primit acetat de leuprolidă 1 mg / kg din greutatea corporală, aplicând o singură doză subcutanată, pe baza Oktem și colab. Acetatul de leuprolidă este un analog GnRH, care are rezultate excelente la femeile cu endometrioză, dar are o utilizare limitată datorită efectelor secundare, caracterizate în principal prin pierderea osoasă și plângeri climatice14.
Analiza histologică a ovarelor a arătat modificări similare în grupurile uncaria și leuprolidă, arătând absența atrofiei corpului galben și a foliculilor ovarieni primari, în majoritatea probelor, ceea ce sugerează absența activității ovariene. În evaluarea histologică a stratului epitelial uterin, grupurile Uncaria și leuprolide au evoluat din nou în mod similar, cu probele lor prezentând straturi epiteliale slab proliferative, spre deosebire de cel observat în grupul placebo cu toate probele lor în faza proliferativă. Aceste date, conform lui Mukherji și Bhowmik12, sunt compatibile cu contracepția.
Concluzie
Luând în considerare constatările histopatologice la șobolani cu endometrioză experimentală expusă la extractul de Uncaria tomentosa și comparate cu controlul pozitiv și negativ grupuri, vă sugerăm că modificările găsite sunt compatibile cu contracepția.
1. Sampson J. Endometrioza peritoneală datorată diseminării menstruale a țesutului endometrial în cavitatea peritoneală. Sunt J Obstet Gynecol. 1927; 14: 442-69.
2. Banu SK, Starzinski-Powitz A, Speights VO, Burghardt RC, Arosh JA. Inducerea endometriozei peritoneale la șoareci goi cu utilizarea celulelor epiteliale și stromale ale endometriozei imortalizate umane: un potențial instrument experimental pentru studierea patogeniei moleculare a endometriozei la om. Fertil Steril. 2009; 91: 2199-209.
4. Braun PD, Ding J, Shen J, Rana N, Fernandez BB, Dmowski WP. Relația dintre apoptoză și numărul de macrofage din endometrul eutopic de la femeile cu și fără endometrioză. Fertil Steril. 2002; 78: 830-5.
6. Olive DL, Pritts AE. Tratamentul endometriozei. N Engl J Med. 2001; 345: 266-75.
8. Kuras M, Nowakowska J, Sliwinska E, Pilarski R, Ilasz R, Tykarska T, Zobel A, Gulewicz K. Modificări în structura cromozomială, activitatea mitotică și conținutul de ADN nuclear din celulele testului Allium induse de extractul de apă din scoarță de Uncaria tomentosa (Wild ) DC. J Ethnopharmacol. 2006; 107: 211-21.
9. Nogueira Neto J, Coelho TM, Aguiar GC, Carvalho LR, Araújo AG, Girão MJ, Schor E. Reducerea experimentală a endometriozei la șobolanii tratați cu Uncaria tomentosa (gheara pisicii) Extract. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2011; 154: 205-8.
10. Quereda F, Barroso J, Acien P. Efecte individuale și combinate ale triptorelinei și gestrinonei asupra endometriozei experimentale la șobolan. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol.1996; 67: 35-40 .
12. Bhowmik T, Mukherjea M. Modificări histologice în ovarul și uterul șobolanului după terapia contraceptivă injectabilă. Contracepție. 1988; 37: 529-38.
15. Salazar E, Jayme V. Epuizarea siturilor de legare specifice pentru receptorul de estrogen de către Uncaria tomentosa. Proc Western Pharmacol Soc. 1998; 41: 123-4.
Conflict de interese: nici unul
Sursa financiară: niciunul