Această tehnică a fost dezvoltată la sfârșitul anilor 1980 și este o metodă puternică de detectează translocațiile (rearanjări între cromozomi).
Pentru dezvoltarea FISH, a fost necesar să se izoleze fiecare cromozom uman. Ulterior, ADN-ul din acești cromozomi a fost fragmentat și pus în celule bacteriene pentru a-l amplifica (a produce multe copii). În acest fel, se poate obține un număr mare de copii de ADN de la fiecare cromozom.
Aceste fragmente de ADN amplificat sunt marcate cu coloranți fluorescenți corespunzători (emițător de lumină) și li se permite hibridizarea (atașarea) la cromozomii metafazici. . ADN-urile marcate cu fluorescență se vor atașa la cromozomii analogi din care au fost derivați. (Fragmentele de ADN cu aceleași secvențe de bază au caracteristica de a se atașa una de cealaltă.)
În acest fel, dacă o parte a unui cromozom vopsit (galben, de exemplu) a suferit un schimb cu altul, non -cromozomi vopsiți (colorat în roșu), este posibil să se detecteze aberația (denumită translocație reciprocă) deoarece cromozomul aberant conține atât segmente galbene, cât și roșii. De obicei, o pereche de cromozomi bicolori poate fi detectată într-o singură metafază, deoarece doi cromozomi schimbă de obicei o parte din ADN-ul lor.
Translocațiile reciproce sunt dificil de detectat prin simpla colorare a întregului set de cromozomi cu un singur material, cum ar fi cu Giemsa. Imaginați-vă, de exemplu, un caz cu care cele două segmente schimbate aveau lungimi similare. Cei doi cromozomi translocați ar trebui să pară perfect normali, atât ca formă cât și ca lungime. Dacă folosim FISH, totuși, o astfel de translocație poate fi detectată în mod clar.
Figura. Un exemplu de cromozomi metafazici tratați cu FISH
Aici, cromozomii 1, 2 și 4 au fost etichetați galben cu FISH, iar ceilalți cromozomi au fost colorați în roșu. Se detectează translocații între cromozomii galbeni și roșii. Imaginea din stânga reprezintă o celulă normală (numerele din figură indică numerele cromozomilor), iar imaginea din dreapta este un exemplu de translocație reciprocă cu doi cromozomi bicolori (indicați prin două săgeți).