Introducere
Transformarea este procesul de introducere a ADN-ului străin (de exemplu, plasmide, BAC) într-o bacterie. Celulele bacteriene în care ADN-ul străin poate fi transformat sunt numite competente. Unele bacterii sunt în mod natural competente (de exemplu B. subtilis), în timp ce altele precum E. coli nu sunt în mod natural competente. Celulele necompetente pot fi făcute competente și apoi transformate printr-una din cele două abordări principale; transformarea chimică și electroporarea.
Există avantaje și dezavantaje ale ambelor metode de transformare. În general, transformarea chimică este mai puțin predispusă la erori și mai rapidă, cu toate acestea, electroporarea produce o eficiență de transformare mai mare (fracțiunea celulelor transformate care absorb efectiv ADN-ul străin). Consultați Clonarea pentru o discuție mai completă a ambelor abordări.
Protocoale
OpenWetWare are deja o serie de protocoale referitoare la transformarea bacteriană, dar mai multe sunt întotdeauna binevenite.
folosiți o variantă pe unul dintre aceste protocoale, vă rugăm să nu ezitați să adăugați un link către protocolul dvs. de pe una dintre aceste pagini, astfel încât ceilalți utilizatori să poată găsi un protocol care le funcționează. În plus, dacă cineva folosește protocoalele de înaltă eficiență Innoe sau Hanahan, vă rugăm să adăugați protocoale aici.
Transformare chimică
Dacă intenționați să efectuați o transformare chimică, atunci ar trebui să le vedeți pagini –
- Pregătirea celulelor chimic competente
- Pregătirea tamponului TSS
- Transformarea celulelor chimic competente
- Pregătirea celulelor chimic competente (Inoue )
- Transformarea celulelor chimic competente (Inoue)
- TOP10 celule chimic competente
Compararea tamponului de transformare chimică
Cineva ar trebui verifica afirmațiile lui Nishimura90. tk 08:58, 25 septembrie 2007 (EDT)
Protocolul de transformare a clorurii de rubidiu aici
Cineva ar trebui să verifice afirmațiile privind competența chimică 1e10 utilizând protocoale de etanol și clorură de calciu 10% aici.
Electroporare
Dacă intenționați să utilizați electroporarea, consultați aceste pagini –
- Celule electrocompetente
- Electroporare
Toate rezumatele Medline: PubMed | HubMed