Esta técnica foi desenvolvida no final dos anos 1980 e é um método poderoso para detectar translocações (rearranjos entre cromossomos).
Para o desenvolvimento de FISH, foi necessário isolar cada cromossomo humano. Posteriormente, o DNA desses cromossomos foi fragmentado e colocado em células bacterianas para amplificá-lo (produzir muitas cópias). Desta forma, um grande número de cópias de DNA de cada cromossomo pode ser obtido.
Esses fragmentos de DNA amplificados são marcados com corantes fluorescentes (emissores de luz) apropriados e podem hibridizar (anexar) aos cromossomos metafásicos . Os DNAs marcados com fluorescência se ligarão aos cromossomos análogos dos quais foram derivados. (Fragmentos de DNA com as mesmas sequências de bases têm a característica de se ligarem uns aos outros.)
Desta forma, se uma parte de um cromossomo pintado (amarelo, por exemplo) tivesse passado por uma troca com outra, não – cromossomos pintados (manchados de vermelho), é possível detectar a aberração (chamada de translocação recíproca) porque o cromossomo aberrante contém segmentos amarelos e vermelhos. Normalmente, um par de cromossomos bicolores pode ser detectado em uma metáfase porque dois cromossomos normalmente trocam uma parte de seu DNA.
As translocações recíprocas são difíceis de detectar pela simples coloração de todo o conjunto de cromossomos com um único material, como com Giemsa. Imagine, por exemplo, um caso com o qual os dois segmentos trocados têm comprimentos semelhantes. Os dois cromossomos translocados devem parecer perfeitamente normais, tanto em forma quanto em comprimento. Se usarmos FISH, entretanto, tal translocação pode ser claramente detectada.
Figura. Um exemplo de cromossomos metafásicos tratados com FISH
Aqui, os cromossomos 1, 2 e 4 foram rotulados de amarelo com FISH e os outros cromossomos foram corados de vermelho. Translocações entre os cromossomos amarelos e vermelhos são detectadas. A imagem da esquerda representa uma célula normal (os números na figura indicam os números dos cromossomos) e a imagem da direita é um exemplo de translocação recíproca com dois cromossomos bicolores (indicados por duas setas).